[发明专利]一种PDMS微控板处理方法及其应用

说明书

本发明涉及一种生物实验方法，尤其涉及一种PDMS微控板处理方法及其应用。包括如下步骤：S1:PDMS表面处理：吸取PBST溶液，加于PDMS表面，处理时间为10‑15min；S2:加入细胞：加入细胞悬液，静置处理后用PBS洗涤将多余留在表面的细胞冲走；S3:捕获mRNA：加入细胞裂解液，使细胞裂解，获得mRNA；S4:反转录及PCR扩增；将捕获到的mRNA进行反转录，获得cDNA；并将cDNA进行PCR扩增，得到PCR产物；S5:纯化DNA。本发明处理方法可通过对其表面进行处理，减少表面吸附性，增加PDMS的相容性，从而提高测试精确度，且本方法具有操作简便、效果好、成本低等优点。

技术领域

本发明涉及一种生物实验方法，尤其涉及一种PDMS微控板处理方法及其应用。

背景技术

PDMS(polydimethylsiloxane，聚二甲基硅氧烷)，是高分子有机硅化合物，固态的PDMS是一种硅胶，具有疏水性(hydrophobic) 和防水性，为无毒、非易燃性、透明弹性体。因其制作简便且快速，成本低，同硅片之间具有良好的粘附性，而且具有良好的化学惰性等特点，成为一种广泛应用于微流控等领域的有机聚合物材料，尤其常见的生物微孔板微芯片材料。由于PDMS具有疏水性，在进行生物实验时具有不相容性，需要对其表面进行处理，使之具有相容性。目前，实验大多通过PBS(phosphate buffer saline，磷酸缓冲盐溶液) +1％BSA(Albumin from bovine serum，牛血清白蛋白)对PDMS表面进行前处理。BSA是牛血清中的一种球蛋白，为白色结晶或类白色冷冻干燥粉末，储存条件为2-8℃，可应用于生化研究，遗传工程和药物研究。现有技术的缺点有：1.BSA本身性质不稳定，需要储存在2-8℃，储存条件严苛，并且需要现配现用，不耐保存。2.BSA 含有微量核酸酶，可能使RNA降解，且不同批次差异大，导致测试结果不稳定。3.BSA价格较高，实验成本高。

发明内容

所要解决的问题：

本发明处理方法可通过对其表面进行处理，减少表面吸附性，增加PDMS的相容性，从而提高测试精确度，且本方法具有操作简便、效果好、成本低等优点。

技术方案：

本发明提供一种PDMS微控板处理方法，包括如下步骤：

S1:PDMS表面处理：吸取PBST溶液，加于PDMS表面，处理时间为10-15min；

S2:加入细胞：加入细胞悬液，静置处理后用PBS洗涤将多余留在表面的细胞冲走；

S3:捕获mRNA：加入细胞裂解液，使细胞裂解，获得mRNA；

S4:反转录及PCR扩增；将捕获到的mRNA进行反转录，获得 cDNA；并将cDNA进行PCR扩增，得到PCR产物；

S5:纯化DNA。

更进一步的技术方案为，所述的S1步骤中PBST溶液为：PBST 溶液为PBS缓冲液与吐温混合液，所述的吐温浓度为0.01％-1％。

所述的吐温20(Tween-20聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯)为黄色或琥珀色澄明的油状液体。聚山梨醇酯类是一大类非离子表面活性剂，具有乳化、扩散、增溶、稳定等作用。

更进一步的技术方案为，所述的S1步骤中PBST溶液为：PBST 溶液为PBS缓冲液与吐温20混合液，所述的吐温浓度为0.02％-0.1％。

更进一步的技术方案为，所述的S1步骤中PBST溶液为：PBST 溶液的中吐温-20浓度为0.02％，所述的处理时间为15min。