[发明专利]一种用复合壳聚糖絮凝法制备甜菊多酚的方法

说明书

本发明公开了一种用复合壳聚糖絮凝法制备甜菊多酚的方法，属于植物提取技术领域。本发明将甜菊叶水提液在室温下用复合壳聚糖絮凝除杂，上清液用大孔极性树脂吸附；流出液用于进一步提取甜菊糖苷；树脂分别用不同浓度的醇水溶液洗脱，低浓度醇水溶液洗脱后，得到的解析液与解析前的流出液合并得到合并液，合并液中总酚含量低于0.5％(以干基计)，合并液留用于提取甜菊糖苷。高浓度醇水溶液洗脱后的洗脱液经过干燥后，得到以异绿原酸为主的甜菊多酚。本发明实现了在原有的甜菊糖苷生产工艺的基础上，同时得到高异绿原酸的甜叶菊多酚，实现了甜叶菊的综合利用，提升企业的经济效益。

技术领域

本发明涉及一种用复合壳聚糖絮凝法制备甜菊多酚的方法，属于植物提取技术领域。

背景技术

甜叶菊是多年生草本，起源于南美洲，广泛种植于中美洲、韩国、巴拉圭等地。含菊糖量为6％-12％，用它提取的甜菊糖苷是一种低热量、高甜度的天然甜味剂，广泛应用与食品和制药工业，其甜度为蔗糖的150-300倍。除了众所周知的甜菊糖苷，甜叶菊的醇、水或者醇水提取物中还含有多酚、类黄酮、奎尼酸和咖啡酸及衍生物、氨基酸和脂肪酸及其衍生物，以及其它需要除去的单宁、鞣质、色素和果胶等杂质。

甜叶菊提取物中，甜菊糖苷为主要产品，而甜菊多酚是甜菊糖苷提取过程中的副产物。提取甜菊糖苷时，通常用铁盐和钙盐来络合除杂；这不仅将甜菊多酚一起并入甜菊渣，更糟糕的是，同时也会产生较多的有机无机混杂的固体废料。甜菊多酚包括绿原酸类、黄酮类、黄酮醇类、黄烷醇类、异黄酮类、原花青素等，目前报道的具有明确结构的甜菊多酚至少有30多种。甜菊多酚多为水溶性多酚化合物，具有良好、稳定的游离基清除能力，也具有抗炎、利尿、抗高血压、降血糖、抗肿瘤和抗氧化性能，还有降压降血脂的功效。产品分析上常常以异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、咖啡酸、木犀草苷、槲皮苷、隐绿原酸、新绿原酸和绿原酸等9种标准品或其中7种多酚为标准品对照，通过HPLC分析含量；或者用福林酚酸法，以一种多酚为标准品对照，通过紫外分析其总酚含量。

由于甜叶菊中多酚的种类繁多，成分较为复杂，尚未作为新产品列入我国法规；而且甜菊多酚相对甜菊糖苷而言是副产物，性能也还没有广为人知，所以很少有专门提取甜菊多酚的工艺。

如前所述，目前的甜菊糖苷提取工艺中，大都是用醇水提取甜菊糖苷后，再用硫酸亚铁和生石灰盐析将大部分甜菊多酚和其它蛋白、鞣质、果胶等杂质一并沉淀下来，然后用大孔树脂进一步纯化分离甜菊糖苷。所以，现有的甜叶菊多酚的提取基本是以提取完甜菊糖苷后的甜菊渣为原料。例如，以甜菊苷残渣为原料，在单因素试验的基础上，采用响应面试验设计，以DPPH自由基的清除能力和提取物中总酚得率为双响应值，对超声提取过程的影响因素即料液比、超声时间、超声功率，进行三因素三水平的试验设计，优化得到甜菊苷残渣中有效抗氧化物质的提取工艺：料液比1:24(g/mL)、超声时间38min、超声功率164W，平均DPPH自由基清除率为(90.47±1.43)％，总酚得率为(16.14±0.36)mg/g(洪怡蓝，《食品科学》,2016,37(18):52-57)。

随着环保意识的增强，硫酸亚铁和生石灰盐析产生的固废问题成为甜菊糖厂面临的一大难题；各种减少硫酸亚铁和生石灰的工艺应运而生。另一方面，对甜菊多酚性能的认识日趋增多。从甜叶菊中直接提取甜菊酚的研究开始不断见诸报道，但都存在提取率低、提取工艺较为复杂、所得甜菊多酚产品热稳定性差、含量低等问题。例如，CN107625801A公开了一种将超声波提取和超临界二氧化碳萃取用于甜叶菊多酚提取的方法。

壳聚糖是一种富含氨基的大分子阳离子多糖，已经被广泛用于污水处理。近年来，壳聚糖也被用于植提中絮凝去除蛋白、鞣质、果胶等杂质。例如，从甜叶菊提取甜菊糖时，絮凝除杂，以及从杜仲叶、金银花提取绿原酸时絮凝除杂。