[发明专利]一种高通量玉米叶片DNA提取的方法在审
| 申请号： | 201811251487.5 | 申请日： | 2018-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN109371009A | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 马丽;邹继军;应继锋;郑秀婷;卢东林;王涛;薄淼 | 申请（专利权）人： | 袁隆平农业高科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 410001 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 玉米叶片 预处理液 高通量 混匀 研磨 提取液 聚乙烯吡咯烷酮 移液工作站 异丙醇沉淀 高度匹配 取上清液 水浴提取 样本处理 有机溶剂 酒精洗 酚类 氯仿 吸出 液氮 去除 沉淀 无毒 自动化 安全 | ||
【权利要求书】：
1.一种高通量玉米叶片DNA提取的方法，其特征在于，包括：
将玉米叶片加入预处理液，研磨；
吸出预处理液弃去，加入DNA提取液；
混匀后水浴提取，将提取液离心，取上清液，加入异丙醇沉淀DNA，混匀，离心，弃去上清；
加入酒精洗沉淀DNA，混匀，离心，弃去上清，即得；
其中，所述预处理液和所述DNA提取液含有0-4％m/v PVP。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述预处理液和所述DNA提取液含有2％m/v PVP。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述预处理液和所述DNA提取液采用如下配比：
试剂 预处理液 DNA提取液 PVP40 2g - PVP30 - 2g 1M Tris-HCl 5mL 10mL 0.5M EDTA 0.5mL 1mL 3MKcl - 33mL 2O]]> 93.5mL 56mL β-巯基乙醇 1mL - 合计 100mL 100mL。
4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，所述水浴提取的提取温度为90-95℃，进一步优选为93℃。
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