[发明专利]一种胶体金免疫层析试纸及其制备方法与应用在审
申请号: | 201811254933.8 | 申请日: | 2018-10-26 |
公开(公告)号: | CN109254157A | 公开(公告)日: | 2019-01-22 |
发明(设计)人: | 韩雪清;王慧煜;孔玉方;梅琳;林祥梅;吴绍强 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577;G01N33/569 |
代理公司: | 北京君慧知识产权代理事务所(普通合伙) 11716 | 代理人: | 王振南 |
地址: | 100176 北京市大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 试纸 胶体金免疫层析试纸 蓝舌病毒 蓝舌病 制备 标准阳性血清 牛病毒性腹泻 商品化试剂盒 现场快速检测 巴氏杆菌病 胶体金标记 交叉反应 快速检测 阳性血清 样品血清 制备过程 检测线 可检测 质控线 检测 抗体 稀释 白血病 应用 申请 优化 | ||
1.一种胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述试纸包括胶体金标记的牛蓝舌病毒vp7蛋白、检测线和质控线。
2.如权利要求1所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述牛蓝舌病毒vp7蛋白的序列为SEQ ID No.2所示序列或在SEQ ID No.2所示序列的末端添加标签序列后的序列。
3.如权利要求1或2所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述胶体金标记的牛蓝舌病毒vp7蛋白中,胶体金的粒径为10—50nm,优选20nm。
4.如权利要求1—3中任一项所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述胶体金标记的牛蓝舌病毒vp7蛋白中,胶体金的pH值为7.0—10.0,优选8.2。
5.如权利要求1—4中任一项所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述胶体金标记的牛蓝舌病毒vp7蛋白中,牛蓝舌病毒vp7蛋白的标金量为6μg/ml—18μg/ml,优选10μg/ml。
6.如权利要求1—5中任一项所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述检测线包含免疫球蛋白;优选的,所述免疫球蛋白的浓度为0.5—2mg/mL,更优选1mg/mL;优选的,所述免疫球蛋白为免疫血清IgG,更优选的,所述免疫球蛋白为兔抗牛IgG、羊抗牛IgG、和/或鼠抗牛IgG。
7.如权利要求1—6中任一项所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述质控线包含抗牛蓝舌病毒vp7蛋白的抗体;优选的,所述抗体的浓度为0.5—2mg/mL,更优选1mg/mL;优选的,所述抗体为单抗和/或多抗。
8.如权利要求1—7中任一项所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于:所述试纸包括:底板,所述底板上依次拼接:样品垫、胶体金结合垫、C/T线的承载体、和吸水垫,
所述胶体金标记的牛蓝舌病毒vp7蛋白附着于所述胶体金结合垫上;
所述检测线和质控线设于所述C/T线的承载体上,
所述C/T线的承载体使用的材料为硝酸纤维素膜,优选为Millipore HiFlow-135;
所述胶体金结合垫使用的材料为玻璃纤维膜,优选为Gls-17930。
9.一种制备权利要求1—8中任一项所述的胶体金免疫层析试纸的方法,所述方法包括将含有胶体金标记的牛蓝舌病毒vp7蛋白的溶液喷涂于胶体金结合垫上的步骤。
10.权利要求1—8中任一项所述的胶体金免疫层析试纸在检测蓝舌病毒抗体中的应用,优选的,所述蓝舌病毒为牛蓝舌病毒。
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