[发明专利]狐亚科激活素A蛋白及其制备与应用

权利要求书

1.狐亚科激活素βA亚基，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.狐亚科激活素A蛋白，其由两个权利要求1所述的狐亚科激活素βA亚基组成。

3.分离的核酸，其编码权利要求1所述激活素βA亚基。

4.根据权利要求3所述的核酸，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

5.载体，其包含权利要求3或4所述的核酸。

6.根据权利要求5所述的载体，其特征在于，所述载体选自pEASY-Blunt SimpleCloning Vector和/或pcDNA4/myc-His。

7.宿主细胞，其被权利要求3或4所述的核酸或权利要求5所述的载体所转化。

8.根据权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞选自CHO细胞系。

9.一种制备狐亚科激活素βA亚基或狐亚科激活素A蛋白的方法，其特征在于，包括：

在培养基中培养权利要求7或8所述的宿主细胞，从所培养的宿主细胞中回收如此产生的蛋白。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，从所培养的宿主细胞中回收的蛋白带有his tag，所述方法还包括将所述蛋白经亲和层析柱处理。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述亲和层析柱的填充物为Ni-AgaroseResin填料。

12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，在用所述亲和层析柱对所得蛋白进行处理时：

Binding Buffer用量为8~12倍柱体积，含有8~12mM咪唑，pH=7.7~8.1；

Soluble Binding Buffe用量为13~17倍柱体积，含有18~22mM咪唑，pH=7.7~8.1；

Soluble Elution Buffer含有480~520mM咪唑，pH=7.7~8.1。

13.权利要求1所述的狐亚科激活素βA亚基，或权利要求2所述的狐亚科激活素A蛋白在制备调节北极狐生理功能的药物中的应用；

所述生理功能包括：组织细胞生长调节，免疫调节，调节神经细胞分化，调节成骨细胞功能，调节红细胞生产，提高FSH受体的表达，降低LH诱导雄激素的生产，增强垂体分泌FSH的能力，促进卵泡发育和成熟，延缓卵泡闭锁和黄体化，促进超数排卵，控制同期发情中的一种或多种。