[发明专利]一种烟草中敌螨普残留量的检测方法

权利要求书

1.一种烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）标准溶液的配制：精确称取敌螨普标准品，溶解定容至棕色容量瓶中，配制成1mg/mL的标准储备液，于-15~-25℃冰箱中避光保存，将标准储备液稀释成系列标准工作溶液，用于制作标准曲线；

2）样品前处理：

提取：称取待测样品至离心管中，加水振荡至样品被水充分浸润后静置8~12min；移取与水等量的1%甲酸-乙腈至离心管中，并以1500~2500r/min速度振荡2~5min；在离心管中分别加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠，加入量为待测样品:无水硫酸镁:氯化钠:柠檬酸钠:柠檬酸氢二钠=1:2:0.5:0.5:0.25，立即以1500~2500r/min速度振荡2~5min；然后以5000~7000r/min离心3~5min；

净化：移取上清液1mL至1.5mL离心管中，加入50~200mg C18分散吸附剂，旋涡振荡2~5min，以5000~6000r/min离心3~5min，吸取上清液过0.22μm有机相滤膜后上机分析；

3）敌螨普残留量的检测：将经过步骤2）处理后的样品，采用气相色谱负化学源质谱联用法检测，并结合步骤1）得到的标准曲线测得敌螨普残留量，敌螨普残留量的检出限为0.02mg/kg，定量限为0.07mg/kg；气相色谱的色谱柱为30m×0.25mm×0.25μm的DB-5MS，进样量1μL，分流比20:1，进样口250℃，升温程序：100℃保持2min，10℃/min升至280℃，保持6min；载气为氦气，1.0mL/min；质谱仪的分析条件为：负化学离子源NCI，反应气为甲烷，采用选择离子SIM模式，特征离子为m/z 278和m/z 279，其中m/z 278为定量离子。

2.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于，步骤1）中所述标准储备液的配制方法为精确称取敌螨普标准品0.1g，精确至0.1mg，以甲醇溶解定容至100mL棕色容量瓶，配制成1mg/mL的标准储备液。

3.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于，步骤1）中所述标准曲线的制作方法具体为用甲醇将敌螨普标准储备液配制成0.01、0.02、0.05、0.1、0.2和0.5mg/L系列质量浓度的敌螨普标准工作溶液，以峰面积对各浓度进行线性回归，得到标准曲线，所述的标准曲线在敌螨普质量浓度为0.01~0.5mg/L范围内呈良好线性，相关系数r²大于0.99。

4.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括添加回收实验，所述的添加回收实验为采用烟草空白样品进行添加回收，将敌螨普标准储备液用于添加回收试验，具体为分别在0.05、0.1、0.5mg/kg 3个添加水平下进行加标回收实验，每个添加浓度设6个平行样本，然后进行样品前处理和检测，所述的敌螨普在烟草中的回收率为95.83%~102.34%，相对标准偏差为3.75%~5.30%。

5.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于，步骤2）中所述提取具体为称取2g待测样品，精确至0.01g，于50mL具盖离心管中，加入10mL水，振荡至样品被水充分浸润后静置10min；移取10mL 1%甲酸-乙腈至离心管中，并置于漩涡混合振荡仪上以2000r/min速度振荡2~5min；在离心管中分别加入4g无水硫酸镁，1g氯化钠，1g柠檬酸钠和0.5g柠檬酸氢二钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000r/min速度振荡2~5min，然后以6000r/min离心3~5min。

6.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于，步骤2）中所述净化具体为移取上清液1mL至1.5mL离心管中，加入50mg C18分散吸附剂，旋涡振荡2min，以6000r/min离心3min，吸取上清液过0.22μm有机相滤膜后上机分析。

7.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于，所述敌螨普标准品的纯度为98%；甲醇、乙腈和甲酸为HPLC级；所述的无水硫酸镁为分析纯且使用前在650℃灼烧4小时，贮存于干燥器中备用；所述的氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠均为分析纯。