[发明专利]一种从金枪鱼眼部制备高生物活性磷脂的方法

说明书

本发明公开了一种从金枪鱼眼部制备高生物活性磷脂的方法，该方法以金枪鱼眼部为原料，低温匀浆后，室温利用超声波辅助乙醇萃取法提取分离金枪鱼眼部的脂质，低温低压蒸馏获得脂质成分，脂质上硅胶柱层析，先后经二氯甲烷、丙酮、甲醇进行洗脱，收集甲醇洗脱液，经分子蒸馏后可获得金枪鱼眼部活性磷脂，该方法促进金枪鱼加工产业的良性发展，又可以丰富海洋生物活性脂质的市场空间，对人类的身体健康和海洋保健食品行业的发展具有积极的意义。

技术领域

本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种从金枪鱼眼部制备高生物活性磷脂的方法。

背景技术

金枪鱼主要分布在太平洋、大西洋和印度洋广阔的海域，是一种长距离洄游性远洋经济鱼类，我国每年对金枪鱼的捕捞量约为8万吨左右，按照加工产生50％-70％的实际下脚料计算，每年约为4-5.6万吨的金枪鱼下脚料。在这些下脚料中，金枪鱼眼部是脂质含量最高的部位，包括大量的活性磷脂成分。在磷脂中，结合有丰富的不饱和脂肪酸，如EPA、DHA等。这些磷脂对提高记忆力和改善代谢综合症等方面具有很好的生物活性。

目前，对金枪鱼脂质的利用仅仅是用于制备深海鱼油，对其磷脂的研究尚未见报道。

发明内容

本发明目的是：提供一种从金枪鱼眼部制备高生物活性磷脂的方法，以解决上述问题。

本发明的技术方案是：

一种从金枪鱼眼部制备高生物活性磷脂的方法，该方法包括如下步骤：

(1)以金枪鱼眼部为原料，去除鱼骨，加入95％碱性乙醇溶液，在温度为4℃的条件下匀浆15-20min，获得金枪鱼眼部混合液；

(2)在超声波作用下，搅拌所述金枪鱼眼部混合液，并从中萃取含有磷脂的脂质，在萃取期间，每隔30min间歇性以超声波辅助萃取，获得含有磷脂的脂质混合液；

(3)在萃取结束后，分别用三层纱布和三层滤纸过滤所述含有磷脂的脂质混合液，取滤液于40-45℃的温度下减压蒸馏以收集脂质部分，乙醇回收重复利用；

(4)取所述脂质部分，在30-45℃的温度下，低流速滴加0.9％NaCl溶液，边滴加边搅拌，在滴加结束后继续搅拌直至出现絮状沉淀，在温度为4℃的条件下12,000×g离心15-20min，取沉淀物即为粗磷脂；

(5)将所述粗磷脂溶解于二氯甲烷中，用硅胶柱层析法进行分离，其中硅胶需用3倍甲醇清洗30min，干燥后于110℃下活化2h、洗脱获得含有磷脂的洗脱液；

(6)收集所述含有磷脂的洗脱液，在温度为40-45℃的条件下减压蒸馏获得纯度较高的磷脂。

进一步的，步骤(1)中所述原料为从金枪鱼鱼眼中心至金枪鱼鱼眼直径的10-15倍部分，所述原料重量与95％碱性乙醇溶液体积之比为1:5-1:10。

进一步的，步骤(1)中所述95％碱性乙醇溶液为向95％乙醇中加入NaOH，使其pH值在10.0-11.0之间。

进一步的，步骤(2)中所述萃取时间为2-5h，萃取温度为40-60℃。

进一步的，步骤(2)中所述超声波处理时间为5-10min，超声声场强度为60-100W/cm²，超声频率为25kHz。

进一步的，步骤(4)中所述边滴加边搅拌的搅拌速度为30-80r/min，滴加速度为0.2-0.6mL/min。

进一步的，步骤(4)中所述0.9％NaCl溶液用量为所述脂质部分重量的2％-5％。