[发明专利]有核红细胞模拟粒子及其制备方法与应用

权利要求书

1.有核红细胞模拟粒子的制备方法，步骤如下：

步骤一、分离并洗涤红细胞，得到纯化红细胞；

所述红细胞为人红细胞；

步骤二、用稀释液稀释纯化红细胞，加入加载剂，在脉冲电磁场的作用下将加载剂引入到纯化红细胞内；

所述加载剂为人工合成的DNA或RNA片段，加载剂的添加量大于1.5μg/L且在3.0μg/L以内；

步骤三、向引入加载剂后的细胞中加入细胞固定液，18-28℃固定，洗涤细胞，用细胞保存液保存，得到有核红细胞模拟粒子。

2.根据权利要求1所述的有核红细胞模拟粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，用稀释液稀释纯化红细胞至10¹²-10¹⁴个/L。

3.根据权利要求1所述的有核红细胞模拟粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，所述稀释液pH值7.1-7.5，由ATP、MgCl₂、KH₂PO₄、NaHCO₃、葡萄糖和水组成，ATP的浓度为0.1％-1.0％，MgCl₂的浓度为0.1％-0.5％，KH₂PO₄浓度为0.5％-3.0％，NaHCO₃浓度为0.05％-0.3％，葡萄糖的浓度0.01％-0.1％。

4.根据权利要求1所述的有核红细胞模拟粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，将脉冲电磁场的作用下将加载剂引入到纯化红细胞内的过程为：电穿孔仪器90-120V电压刺激4-8秒钟。

5.根据权利要求1所述的有核红细胞模拟粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤一和步骤三中，洗涤采用的洗涤剂包括缓冲液、防腐剂、无机盐和水。

6.根据权利要求1所述的有核红细胞模拟粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤三中，细胞固定液包括固定剂、缓冲液、EDTA-2Na、防腐剂和水；固定剂为甲醛、乙醛、戊二醛、多聚甲醛、甲醇、丙酮中的一种或多种；固定时间为3-5h。

7.根据权利要求1所述的有核红细胞模拟粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤三中，细胞保存液包括缓冲液、营养成分、防腐剂和水。

8.权利要求1-7任何一项所述的有核红细胞模拟粒子的制备方法制备的有核红细胞模拟粒子。

9.权利要求8所述的有核红细胞模拟粒子作为以核酸荧光染色为检测原理的血液细胞分析仪的质控物的应用。