[发明专利]表皮葡萄球菌在合成异丁酸中的应用在审

专利信息
申请号: 201811266841.1 申请日: 2018-10-29
公开(公告)号: CN109295114A 公开(公告)日: 2019-02-01
发明(设计)人: 张国霞;方舒婷;吴继国;叶菊风;任悄悄;吴镇东 申请(专利权)人: 南方医科大学
主分类号: C12P7/40 分类号: C12P7/40;C12R1/44
代理公司: 广州市天河庐阳专利事务所(普通合伙) 44244 代理人: 胡济元
地址: 510515 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 表皮葡萄球菌 异丁酸 保藏 合成 微生物菌种保藏 应用
【说明书】:

发明涉及表皮葡萄球菌在合成异丁酸中的应用,其中所述的表皮葡萄球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心,其保藏号为GDMCC No:60458。本发明所述的表皮葡萄球菌具有较强的快速产异丁酸能力,每克干菌8小时可产异丁酸358.59~436.56μg。

技术领域

本发明涉及微生物,具体涉及葡萄球菌属,特别是涉及表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)及其代谢物。

背景技术

异丁酸4个碳原子的支链脂肪酸,主要来源于脯氨酸、精氨酸、赖氨酸的降解终产物,同时也是合成支链缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和脯氨酸等重要氨基酸的原料。异丁酸是消化道内产琥珀酸丝状杆菌等纤维降解菌的生长因子.能提高纤维分解菌的数量和对植物细胞壁的消化能力,从而提高纤维的消化率。还可以削弱它的前体氨基酸在乳腺组织的分解代谢。过剩的支链氨基酸可用于非必需氨基酸的生物合成或参与其它生物合成反应,从而增加氮沉积。使微生物蛋白的合成增加,提供营养。可见,异丁酸在人体和动物肠道中都是较必需的有益因子。但是异丁酸的含量决定着其功能的发挥,所以寻找能够产生异丁酸的资源非常重要。目前绝大多数研究成果都是菌群和肠组织的功效,高效产异丁酸的单一自然菌种资源非常少。

现有文献报道中,产异丁酸的主要微生物有大肠杆菌、芽孢杆菌、酿酒酵母、恶臭假单胞菌、梭杆菌属的细菌、拟杆菌属、产黑色素类杆菌、消化链球菌、链球菌科的部分细菌和乳酸乳球菌等,这些资源中有一些是重组微生物。它们产生异丁酸的时间需要24-96小时不等,所产的异丁酸的量约为几十毫摩尔。

发明内容

本发明所要解决的技术问题的是提供表皮葡萄球菌的用途。

上述表皮葡萄球菌的用途具体是:

表皮葡萄球菌在合成异丁酸中的应用,其中所述的表皮葡萄球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心,其保藏号为GDMCC No:60458。

上述应用中,所述的表皮葡萄球菌的培养方法如下:

取健康人的粪便加入PBS溶液溶解并使得粪便在溶液中的浓度为10g/L,静置,取上清液2ml,加入100mlECY液体培养基,在37℃条件下密闭厌氧静止培养,观察到有明显的浑浊后转至ECY固体培养基中继续培养1天,挑取快速生长的菌落在所述ECY固体培养基上进行纯化,得到单菌落,即所述表皮葡萄球菌菌株;将得到的菌株保存在体积浓度为15%的甘油水溶液中,备用;其中,

所述的ECY固体培养基常温下每1000ml由以下原料组成:

水苏糖2.4-4.4g,胰酪胨5.8-7.8g,酵母粉3.2-5.2g,氯化钠3.7-5.3g,KH2PO40.5-0.7g,MgSO4·7H2O 3.0-4.5g,无水乙醇3.8-4.0ml,琼脂粉15.3g-19.6g,其余为蒸馏水;

所述ECY固体培养基的pH值为6.1~7.5;

所述的ECY液体培养基每1000ml由以下原料组成:

水苏糖2.4-4.4g,胰酪胨5.8-7.8g,酵母粉3.2-5.2g,氯化钠3.7-5.3g,KH2PO40.5-0.7g,MgSO4·7H2O 3.0-4.5g,无水乙醇3.8-4.0ml,其余为蒸馏水;

所述ECY液体培养基的pH值为7.2±0.1。

上述应用中,所述的异丁酸的合成方法如下:

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