[发明专利]一种HPV分型核酸检测血样标本处理方法在审
申请号: | 201811267085.4 | 申请日: | 2018-10-29 |
公开(公告)号: | CN109517876A | 公开(公告)日: | 2019-03-26 |
发明(设计)人: | 朱爱丽;周婷婷;许友强;李雨艳;刘明珠;张馨月 | 申请(专利权)人: | 吉林金域医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24 |
代理公司: | 长春众邦菁华知识产权代理有限公司 22214 | 代理人: | 刘微 |
地址: | 130000 吉林省长春市高新*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红细胞 样本 宫颈脱落细胞 核酸检测 血样标本 脱落细胞保存液 预处理 假阴性结果 血细胞 检测结果 体外检测 假阴性 血样本 核酸 成功率 悬浮 分类 检测 保证 | ||
1.一种HPV分型核酸检测血样标本处理方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采集宫颈脱落细胞,将宫颈脱落细胞样本进行分类:
红细胞数量小于0.01×1012个/每升的样本为A类样本;
红细胞数量在(0.01~0.1)×1012个/每升的样本为B类样本;
红细胞数量在(0.1~3)×1012个/每升的样本为C类样本;
红细胞数量大于3×1012个/每升的样本为D类样本;
(2)样本分类后,按照红细胞的多少加入脱落细胞保存液进行预处理,处理方法:
A类样本直接用于实验;
B类样本与脱落细胞保存液混匀后用于实验,所述B类样本与所述脱落细胞保存液的体积比为550~650:350~450;
C类样本与脱落细胞保存液混匀后用于实验,所述C类样本与所述脱落细胞保存液的体积比为350~450:550~650;
D类样本与脱落细胞保存液混匀后用于实验,所述D类样本与所述脱落细胞保存液的体积比为150~250:750~850。
2.根据权利要求1所述的HPV分型核酸检测血样标本处理方法,红细胞的计数方法为:待测样本震荡混匀后用等渗稀释液稀释,滴入血细胞计数板,在显微镜下计数红细胞数量,换算得到样本中含有的红细胞数量。
3.根据权利要求1所述的HPV分型核酸检测血样标本处理方法,其特征在于,所述的脱落细胞保存液为含异丙醇的醋酸盐缓冲液,pH值为5~6。
4.根据权利要求3所述的HPV分型核酸检测血样标本处理方法,其特征在于,所述的脱落细胞保存液为上海透景生命科技有限公司生产的脱落细胞保存液。
5.根据权利要求1~4任一项所述的HPV分型核酸检测血样标本处理方法,其特征在于,将预处理后的样本按如下步骤进行检测:
S1、取含有宫颈脱落细胞样本的EP管,13200rpm高速离心5~10min,吸弃上清;
S2、加入200μl脱落细胞核酸释放剂,充分振荡混匀,放置100℃干浴15~20min;
S3、13200rpm高速离心10~15min,取5μl上清加入扩增反应管内,上机扩增1.5h;
S4、吸取3μl上清加入22μl微球杂交液中,杂交40min;
S5、加入75μl链霉亲和素-藻红蛋白溶液,48℃孵育15~20min,采用流式分析仪进行检测。
6.根据权利要求5所述的HPV分型核酸检测血样标本处理方法,其特征在于,步骤S2所述的脱落细胞核酸释放剂为上海透景生命科技有限公司生产的脱落细胞核酸释放剂。
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