[发明专利]一种区分双孢蘑菇4个主栽品种的SSR-PCR鉴定方法有效
| 申请号： | 201811269851.0 | 申请日： | 2018-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN109207625B | 公开（公告）日： | 2022-01-04 |
| 发明（设计）人： | 蔡志欣;陈美元;廖剑华;郭仲杰;卢园萍;施肖堃;王泽生 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院食用菌研究所（福建省蘑菇菌种研究推广站） |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350014 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 区分 蘑菇 个主栽 品种 ssr pcr 鉴定 方法 | ||
1.一种区分双孢蘑菇4个主栽品种的SSR-PCR鉴定引物，其特征在于：所述引物序列为：
Scaf4_1k11F：5’-CAATCACAATCCCTCCAAGC-3’，
Scaf4_1k11R：5’-AAACGAATTAGGAACGGTGG-3’；
所述双孢蘑菇4个主栽品种为品种As2796、W192、福蘑38和A15。
2.利用权利要求1所述引物用于区分双孢蘑菇4个主栽品种的SSR-PCR鉴定方法，其特征在于：利用权利要求1中所述的引物对Scaf4_1k11F和Scaf4_1k11R对双孢蘑菇主栽品种As2796、W192、福蘑38和A15的基因组DNA进行SSR-PCR扩增，其特异性地扩增图谱为：As2796扩增出1004bp的产物；W192扩增出801bp的产物；福蘑38扩增出1004bp 和801bp的产物；A15扩增出1004bp、801bp和252bp的产物。
3.根据权利要求2所述的一种区分双孢蘑菇4个主栽品种的SSR-PCR鉴定方法，其特征在于：所述SSR-PCR扩增的条件为： 94℃预变性5min；94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸1min，扩增35个循环；72℃延伸10min， 4℃保存。
4.根据权利要求2所述的一种区分双孢蘑菇4个主栽品种的SSR-PCR鉴定方法，其特征在于：所述SSR-PCR扩增的反应体系为：模板DNA 30ng，引物Scaf4_1k11F 30ng，引物Scaf4_1k11R 30ng，dNTPs 0.1 mmol/L，MgCl2 2.5 mmol/L，Taq DNA聚合酶 1 U，1×PCR缓冲液10µL，用ddH2O将总体积补至20µL。
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