[发明专利]一种包载YGLF纳脂体的制备方法

说明书

一种包载YGLF纳脂体的制备方法，涉及降血压肽YGLF。将YGLF溶解在氨水溶液中作为水相；油相为丙酮和二氯甲烷混合物，将水相放入油相中超声，在超声压力下水相通过超声，进入到油相中，得初乳液；将乳化剂与初乳液混合，搅拌超声后形成乳状液，再搅拌后得乳白色复乳状液；将脂质膜材料溶于有机溶剂中，减压，旋转蒸发挥去有机溶剂，得薄膜；将薄膜与乳白色复乳状液混合，高温水化脱膜，超声后均质或挤出，得到包载YGLF纳脂体。以PLGA为内核，以大豆卵磷脂、胆固醇和PEG化胆固醇为壁材，采用薄膜水化法制备包载YGLF纳脂体，并对纳脂体的形态结构及稳定性，体内降压情况进行了分析。

技术领域

本发明涉及降血压肽YGLF，尤其是涉及一种包载YGLF纳脂体的制备方法。

背景技术

YF4(Tyr-Gly-Leu-Phe，YGLF)是一种从动物体内提取出的小分子血管紧张素转化酶抑制多肽，体外研究表明，其血管紧张素转化酶抑制活性良好，然而自发性高血压大鼠(SHR)灌胃给药后，降压药效甚微。主要原因可能为：YF4作为蛋白多肽类药物，口服给药时，极易被胃肠道中广泛存在的酶类降解失活，使得其口服生物利用度极低；此外，吸收入血后，由于药物半衰期较短，尚未进入血液循环就已失活，因而无法发挥理想的降压作用。核壳型纳米脂质体(纳脂体)，用于装载降压肽YF4(YF4-LNPs)，可以克服胃肠道的恶劣环境且可以对其起到保护作用，极大地保持YF4的生理特性，提高其稳定性。

纳脂体是目前提高蛋白质以及多肽类药物体内稳定性以及实现肠道靶向释放的重要方法。纳脂体是通过混合油性组分和表面活性剂/助表面活性剂以适当的比例，使用高能过程(均化器，微流化器，或超声波发生器)来制造乳剂。这一方法成功地避免了高温，保护了肽的生物活性。脂质包衣PLGA纳米微粒系统(脂质纳米粒、LNPs)不仅结合了高分子纳米粒子和脂质体的优点,而且避免了它们的缺陷。微粒和纳米粒的双重好处使它成为一个优秀口服药物载体，用以增强制剂的生物相容性和可持续的释放。在这个系统中,药物可以有效地包裹在纳米粒子的核心和/或脂质双层,导致药物负荷能力的增加。聚合物芯也可以延缓药物扩散速率。另外，LNPs的稳定性可以由脂壳进一步增加。

纳脂体乳剂是由脂质膜水化纳米乳剂进一步得来。纳米乳剂是由于内部存在不同极性的单相溶液，可以促进溶解亲水或亲脂性材料。通过形成将亲水性肽封入微/纳米乳液中简单的W/O乳液或多种W/O/W乳液得到。此外，通常也是水相用于乳液中，以促进溶解和包封的亲水性药物。纳脂体乳剂最后通过超声或挤出均质的方法获得，可实现乳液的尺寸均一性和可控性、微球表面功能的可控性和稳定性；实现均一乳液大规模制备的可行性等。SPG膜乳化法制备的微球，粒径范围为2～300μm，在药学领域可以作为控制药物释放的载体，将水溶性的抗高血压药物包埋制备成微球，提高生物利用率等。

发明内容

本发明的目的是提供一种包载YGLF纳脂体的制备方法。

本发明包括以下步骤：

1)将YGLF溶解在氨水溶液中作为水相；油相为丙酮和二氯甲烷混合物，将水相放入油相中超声，在超声压力下水相通过超声，进入到油相中，得初乳液；

2)将乳化剂与步骤1)中的初乳液混合，搅拌超声后形成乳状液，再搅拌后得乳白色复乳状液；

3)将脂质膜材料溶于有机溶剂中，减压，旋转蒸发挥去有机溶剂，得薄膜；

4)将步骤3)得到的薄膜与步骤2)得到的乳白色复乳状液混合，高温水化脱膜，超声后均质或挤出，得到包载YGLF纳脂体。

在步骤1)中，所述将YGLF溶解在氨水溶液中作为水相，YGLF按体积百分比为氨水溶液的1.5％，氨水溶液的pH可为13；所述油相中丙酮和二氯甲烷的体积比可为1∶5；所述超声的时间可为1.5min；所述初乳液为W/O/W型乳状液，在初乳液中初乳体积与水相的体积比可为1∶3。