[发明专利]一种利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法有效
申请号: | 201811300165.5 | 申请日: | 2018-11-02 |
公开(公告)号: | CN109400760B | 公开(公告)日: | 2020-12-15 |
发明(设计)人: | 金征宇;柏玉香;纪杭燕 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C08B37/16 | 分类号: | C08B37/16 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人: | 时旭丹;张仕婷 |
地址: | 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 环糊精 水解 纯化 方法 | ||
1.一种利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:其以淀粉或糊精为底物,用缓冲溶液配置一定浓度的底物溶液,加入一定量以γ-CD为产物的环糊精葡萄糖基转移酶,控制反应温度和反应时间,反应结束后,灭酶;以上述反应液为底物,向其中加入一定量的环糊精水解酶,控制反应温度和反应时间,反应结束后灭酶;
所述环糊精葡萄糖基转移酶为CGTase,其以γ-CD为产物;具体包括以γ-CD为主产物的γ-CGTase和产物中含有不同比例的γ-CD的α-CGTase,β-CGTase;
所述环糊精水解酶在GenBank中的编号为WP_048164969.1。
2.如权利要求1所述利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:所述糊精具体为麦芽糊精或环糊精。
3.如权利要求1所述利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:所述淀粉具体为玉米淀粉,马铃薯淀粉,木薯淀粉,红薯淀粉,豌豆淀粉,小麦淀粉,大米淀粉,绿豆淀粉,红豆淀粉,莲子淀粉或栗子淀粉。
4.如权利要求3所述利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:所述玉米淀粉具体为高直链玉米淀粉或蜡质玉米淀粉。
5.如权利要求1所述利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:所述缓冲溶液浓度为10-200 mM、pH为4-10。
6.如权利要求1所述利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:所述底物溶液质量/体积浓度为1%-30%。
7.如权利要求1所述利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:所用环糊精葡萄糖基转移酶的添加量为0.1-50U,控制反应温度为40-80℃,反应时间为1-48h。
8.如权利要求1所述利用环糊精水解酶纯化γ-环糊精的方法,其特征在于:所用的环糊精水解酶的添加量为0.1-50U,反应温度为50-100℃,反应时间为1-24h。
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