[发明专利]一种基于循环扩增技术和羧基碳量子点的荧光生物传感器及其制法和应用在审

专利信息
申请号: 201811306302.6 申请日: 2018-11-05
公开(公告)号: CN109444098A 公开(公告)日: 2019-03-08
发明(设计)人: 接贵芬;李春丽 申请(专利权)人: 青岛科技大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64;C12Q1/6825
代理公司: 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 代理人: 郝团代
地址: 266000 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 循环扩增 量子点 荧光生物传感器 茎环结构 灵敏检测 羧基碳 靶标 制法 肿瘤相关基因 测定混合物 靶标刺激 多轮驱动 合成生物 纳米机器 燃料分子 循环产物 荧光恢复 荧光基团 荧光探针 羧基功能 酶催化 目标物 无标记 相容性 荧光 淬灭 痕量 引物 应用 放大 肿瘤 下放 驱动 诊断 研究
【权利要求书】:

1.一种基于酶催化靶标循环扩增技术并结合羧基碳量子点的荧光生物传感器,其特征是:利用DNA纳米分子机器,对目标进行循环放大,并合成生物相容性良好的羧基碳量子点(cCQD),作为荧光淬灭剂发挥作用,构建用于核酸检测的荧光传感平台。

2.一种制备权利要求1所述的基于酶催化靶标循环扩增技术并结合羧基功能化的碳量子点的荧光生物传感器的制法和应用,其特征方法由下列步骤组成:

步骤1.荧光淬灭过程:为实现荧光淬灭,用Tris-HCl缓冲液将荧光DNA寡核苷酸(FAM-probe)稀至40nM左右,制得荧光DNA寡核苷酸(FAM-probe)的溶液。然后将最适体积的cCQD溶液加入到含有FAM-probe的TrisHCl缓冲溶液中并使其在室温下孵育30min。cCQD作为纳米淬灭剂,可以被用作荧光传感平台来检测核酸。

步骤2 生物传感器的制备:先在浓度为40nM FAM-probe荧光探针中加入40μL cCQD,在50℃下孵育30min。cCQD作为纳米淬灭剂,能够淬灭FAM-probe荧光探针上所携带的荧光基团,导致荧光淬灭。培养后,将由靶标刺激循环扩增过程的S1循环产物加入,室温下放置20min,致使荧光恢复,然后测定混合物的荧光强度。

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