[发明专利]一种猴头菇多糖的提取方法在审
申请号: | 201811306371.7 | 申请日: | 2018-11-05 |
公开(公告)号: | CN109336991A | 公开(公告)日: | 2019-02-15 |
发明(设计)人: | 肖志勇;方丽金;郑秋芳;叶艳鹏 | 申请(专利权)人: | 福建拓天生物科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 杭州千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 裴金华 |
地址: | 350011 福建省*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 猴头菇多糖 固液分离 猴头菇 提取物 水解 滤渣 淀粉酶 双氧水 超滤膜超滤 木瓜蛋白酶 提取物收率 破壁处理 纤维素酶 自然晾干 超声波 醇沉法 果胶酶 水混合 提纯 切片 去除 备用 微波 合并 新鲜 重复 | ||
1.一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于包括下列步骤:
步骤一:新鲜猴头菇选取,去除劣质部位,水洗,切片,自然晾干,初次粉碎;
步骤二:将所述初次粉碎后的猴头菇,与水混合,先后用微波、超声波进行破壁处理,降温,固液分离,得到滤液1和滤渣;
步骤三:滤渣重复进行1-3次所述步骤二处理,将各批次的滤液1合并得到滤液2,备用;
步骤四:在滤液2中加入纤维素酶、淀粉酶、果胶酶,水解,固液分离,得滤液3;
步骤五:在滤液3中加入木瓜蛋白酶,水解,固液分离,得滤液4;
步骤六:在滤液4中加入双氧水,搅拌,超滤膜超滤,收集分子量8000道尔顿以上的组分;
步骤七:将所述收集到的组分溶于水,再加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀,吸去上清液,下部混合液进行离心分离,干燥,得猴头菇多糖。
2.根据权利要求1所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤二为:
将所述初次粉碎后的猴头菇,与水按照料液比1g∶(3-15)mL混合,先用微波处理5-12min,再用超声波进行破壁处理10-60min,降温至35-55℃,固液分离,得到滤液1和滤渣。
3.根据权利要求2所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤四为:
调节所述滤液2的pH为3.5-5.5,加入纤维素酶、淀粉酶、果胶酶,35-55℃水解0.5-5h,固液分离,得滤液3;所述纤维素酶活性为10000-20000u/g;所述纤维素酶质量用量为滤液2质量的0.4-0.8倍;所述淀粉酶活性为8000-20000u/g;所述淀粉酶质量用量为滤液2质量的0.1-0.3倍;所述果胶酶活性为8000-25000u/g;所述果胶酶质量用量为滤液2质量的0.3-0.7倍。
4.根据权利要求3所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤五为:
调节所述滤液3的pH为3-6,加入木瓜蛋白酶,35-55℃水解0.5-3h,固液分离,得滤液4;所述木瓜蛋白酶活性为500000-900000u/g;所述木瓜蛋白酶质量用量为滤液3质量的0.4-1.6倍。
5.根据权利要求4所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤六为:
调节所述滤液4的pH为7-9,加入双氧水,在25-50℃下保温搅拌0.1-1h,超滤膜超滤,收集分子量8000道尔顿以上的组分;所述双氧水的摩尔量以滤液4的体积计为1-12mmol/mL。
6.根据权利要求5所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤七为:
将所述收集到的组分按照料液比1g/(1-10)mL溶于水,再按体积比1:(3.5-4.5)缓缓加入乙醇,搅拌均匀,静置沉淀5-48h后,吸去上清液至原体积16%以下,下部混合液进行离心分离,将所得沉淀干燥,即得猴头菇多糖。
7.根据权利要求2-6中任一项所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于:
步骤二中,所述微波处理的时间为6-7min,所述超声波处理的时间为15-17min。
8.根据权利要求3-6中任一项所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于:
步骤四中,所述水解时间为2-2.5h;所述纤维素酶活性为14000-16000u/g;所述纤维素酶质量用量为滤液2质量的0.6-0.65倍;所述淀粉酶活性为13000-15000u/g;所述淀粉酶质量用量为滤液2质量的0.15-0.18倍;所述果胶酶活性为12000-15000u/g;所述果胶酶质量用量为滤液2质量的0.45-0.5倍。
9.根据权利要求4-6中任一项所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于:
步骤五中,所述水解时间为1.2-1.5h;所述木瓜蛋白酶活性为700000-800000u/g;所述木瓜蛋白酶质量用量为滤液3质量的0.75-0.8倍。
10.根据权利要求1-6中任一项所述的一种猴头菇多糖的提取方法,其特征在于:
步骤七中,所述干燥为冷冻干燥。
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