[发明专利]一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法

权利要求书

1.一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法，其特征在于包括下列步骤：

步骤一：新鲜猴头菇子实体选取，去除劣质部分，水洗，磨浆；

步骤二：将所述磨浆后的猴头菇子实体，先用微波处理3-8min，再用超声波进行处理5-20min，降温至35℃以下，备用；

步骤三：在步骤二处理后的猴头菇子实体浆料中加水，搅拌，配制得到猴头菇子实体母液；所述配制得到的母液中猴头菇子实体与水的比例为0.03-0.2 g/mL；

步骤四：将所述母液在65-85℃下灭菌处理10-100min，将混合菌种接种于种子罐的猴头菇子实体母液中35-37℃下培养12-28h，所述混合菌种的总接种量为5-10%；所述混合菌种由乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌组成，其中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为1-5∶0.5-2∶1；

对种子罐培养好的培养液进行镜检，确认无杂菌污染；将确认无杂菌污染的培养液接种于发酵罐培养，接种量为5-10%，在35-37℃下培养10-60h，经酸度测试，pH值降到4-4.5即培养完成；将培养完成后的发酵液进行灭活处理；

步骤五：将发酵液进行固液分离，得滤液1和滤渣，滤渣用清水淋洗，收集淋洗水，淋洗水静置分离出沉淀，取淋洗水上清液跟滤液1合并，得到液体2，液体2加入乙醇，静置分层，弃上清液，然后离心分离，将所得沉淀进行干燥，即得猴头菇多糖；

所述干燥包括下列步骤：

S5.1：将所述沉淀置于冷藏室中冷藏至3-7℃；

S5.2：采用快速冷冻技术，将冷藏后的沉淀在5-40min之内冷冻至零下5-零下65℃，得到冷冻后的沉淀；所述快速冷冻技术为干冰冷冻、液氮冷冻、气体涡轮膨胀制冷或玻璃化超快冷冻中的一种；

S5.3：以35-65℃、干燥的非氧化性气体吹于冷冻后的沉淀的表面，干燥至含水量为1.8-2.5%。

2.根据权利要求1所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法，其特征在于，所述步骤五为：

将所得发酵液采用板框压滤或减压抽滤的方法分离，得滤液1和滤渣，滤渣用清水淋洗，收集淋洗水，淋洗水静置分离出沉淀，取淋洗水上清液跟滤液1合并，得到液体2，液体2浓缩后，缓缓加入乙醇，搅拌均匀，静置沉淀6-40h，吸去上清液至原体积的17%以下，下部混合液进行离心分离，将所得沉淀干燥；所述乙醇与浓缩后的液体2的体积比为3.5-4.5∶1。

3.根据权利要求2所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法，其特征在于，步骤四中，所述灭活的具体条件为：

在100-110℃下处理25-35min。

4.根据权利要求3所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法，其特征在于：

所述混合菌种中乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的接种量之比为1.9-2.1∶0.7-0.8∶1。

5.根据权利要求1所述的一种采用发酵工艺的高效提取猴头菇多糖的方法，其特征在于，还包括：

步骤六：将所得干燥产物粉碎，包装。