[发明专利]血样本的化验方法

说明书

血样本的化验方法。本发明提供一种测量含有血细胞样品的血浆部分中一种或多种被分析物质的酶方法，包括第一组分和第二组分，如果第二组分存在并且未被封闭，第二组分则会干扰第一组分的测量。

本申请是国际申请号为PCT/EP2012/072336、国际申请日为2012年11月19日、发明名称为“血样本的化验方法”的发明专利申请的分案申请，原申请进入中国国家阶段获得的国家申请号为201280056696.9。

技术领域

本发明涉及含有细胞的血样本，例如全血样本中，多种成分的测量，例如脂类成分的测量。特别的，本发明涉及血浆中脂类成分的测量，例如与特异的脂蛋白种类相关的胆固醇和甘油三酯的测量，特别是通过酶化验的方式进行测量。最特别的，本发明发涉及在“床边”设备中进行的自动化方法在诸如诊断、预后和风险分析化验中的用途。

背景技术

体液样本中多种成分的测量是临床评估的普通特点。从体液样本中特异被分析物质的浓度，或从几种组分浓度分布，可以做出很多诊断或确诊，说明疾病的状态或进度，或者很多状况风险都可以被评估。疾病状态和一种或多种被分析物浓度之间已知相关性的增加，使得这种对样品中一种和多种被分析物的分析变成一种越发有价值的工具。因此为了越来越快的分析越来越多样品，这相应的对临床实验室增加了压力。为了满足这个(需求)，这就需要更快、更高的生产量，更简单和/或更全自动的化验。

在“床边”中开展化验的需求一直在增长。不间断转移慢性疾病到初级保健的需求正在增加。这对患者是有益的，患者可以获得即时的建议并且留下更少的不确定性。这也显示了“病人旁边”的检测提高了患者的依从性，坚持治疗和治疗控制(Price.(2001)BMJ332:1285-8)。这也对医疗实践者有益，他们能潜在的避免为了多种预约的需要并能更加确定她的判断。

依照操作简单和结果快速的要求，床边化验有特殊的需求。如果化验需要花费不只是那么几分钟，那床边操作的优势就不复存在。而且，虽然操作这些化验的全体员工可能是医疗保健专家，但是他们并不是分析专家，而且并不能使用多种仪器。因此有必要设计这样的依靠最小量样品处理的化验。出于这个原因，出于时间，人力资源和成本的原因，通常在单个检测设备，单台分析仪器，用单个样品的单次操作确定多种不同被分析物的水平是非常有优势。这避免了对样品的扩展操作，多种检测设备或多种分析仪器的昂贵的耗时的需求。

因此有必要设计这样的依靠最小量样品处理的化验。出于这个原因，出于时间，人力资源和成本的原因，通常在单个检测设备，单台分析仪器，用单个样品的单次操作确定多种不同被分析物的水平是非常有优势。这避免了用于延伸的样品操作，多种检测设备或多种分析仪器的昂贵的耗时的需求。

床边方法的一个特别的问题是它们很少能容纳校准。这与以酶为基础的化验方法的特殊性有关，因为在存贮过程中酶本身的敏感性可能会失活。

避免未知酶活性的常用方法是确定酶反应的终点。形成终产物的数量将仅依赖于开始反应时存在的被分析物数量，提供了足够的试剂来转化所有被分析物为产物，并提供了全部转化所需的充足的时间。只要有足够活力的酶来催化反应，酶的活力将仅决定反应速率而不是终点。然而，这个方法需要不仅大量的酶，这增加成本和/或需要充分长的化验时间，这增加了总的化验时间。特别涉及到床边化验，通常应在5-10分钟完成。

需要特别关心的是不产生可测定终点的酶反应。这样的情况包括连锁反应即之前的反应达到终点前下一次反应开始了或发生平行反应。类似的，一个组分在存在第二被封闭组分的情况下起反应，该第二组分在不存在“封闭”时也将反应，因此终点仅在封闭是“永久”的时候达到，例如通过共价反应。然而很多封闭试剂只有暂时的效果，如果在需要达到终点的时候第二组分变为任何程度的“不可封闭”，那么不能达到第一组分的反应终点。