[发明专利]一种检测甲胎蛋白异质体AFP-L3含量的试剂盒/试剂板在审
| 申请号： | 201811313128.8 | 申请日： | 2018-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN109254158A | 公开（公告）日： | 2019-01-22 |
| 发明（设计）人： | 冉盼盼;史小芹;渠文涛;马雷;周金龙;刘雅奇;郑业焕;李晓霞;乔晓芳;付光宇;吴学炜 | 申请（专利权）人： | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/574;G01N21/76 |
| 代理公司： | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甲胎蛋白抗体 试剂盒 甲胎蛋白异质体 磁微粒混悬液 繁琐步骤 包被板 链霉素 生物素 种检测 吖啶酯 辣根过氧化物酶标记 辣根过氧化物酶 夹心复合物 特异性结合 发明试剂 放大效应 高亲和力 临床检测 强吸附性 生物素化 直接检测 灵敏度 校准品 血清 检测 包被 | ||
1.一种检测甲胎蛋白异质体AFP-L3含量的试剂盒，其特征在于：包括生物素LCA，包被有甲胎蛋白抗体的磁微粒混悬液或包被板，辣根过氧化物酶/吖啶酯标记的甲胎蛋白抗体，辣根过氧化物酶标记/吖啶酯标记的链霉素及校准品。
2.根据权利要求1所述的检测甲胎蛋白异质体AFP-L3含量的试剂盒，其特征在于：所述包被有甲胎蛋白抗体的磁微粒混悬液的制备方法为：
将粒径1.03~1.25μm的磁微粒原液充分混匀、洗涤后，加入EDC和NHS活化剂，混匀震荡、洗涤后，加入LCA非竞争性AFP抗体，混匀震荡；采用乙醇胺终止反应，最后用封闭液封闭，2~8℃保存待用。
3.根据权利要求1所述的检测甲胎蛋白异质体AFP-L3含量的试剂盒，其特征在于：所述包被有甲胎蛋白抗体的包被板的制备方法为：
将LCA非竞争性AFP抗体按照5μg/ml投入PB/CB中，静置2~8℃条件下过夜，清洗后加入保护液室温封保4~6小时，甩干、干燥后2~8℃密封保存待用。
4.根据权利要求1所述的检测甲胎蛋白异质体AFP-L3含量的试剂盒，其特征在于：所述生物素LCA的配制方法为：用0.05~0.1mol Tris/TAPS/MOPS/MES/磷酸盐，0.15~0.2molNaCl配制成pH=7.0~7.2的稀释用缓冲液，将-20℃保存的生物素化LCA原液稀释100倍后，2-8℃保存待用。
5.根据权利要求1所述的检测甲胎蛋白异质体AFP-L3含量的试剂盒，其特征在于：所述辣根过氧化物酶/吖啶酯标记的甲胎蛋白抗体的配制方法为：按照1/1500~1/2000将辣根过氧化物酶/吖啶酯标记的甲胎蛋白抗体置于牛血清蛋白和磷酸盐缓冲液中，2-8℃保存待用；其中的磷酸盐缓冲液中含有0.1 %体积的Proclin300或NaN3或MIT。
6.根据权利要求1所述的检测甲胎蛋白异质体AFP-L3含量的试剂盒，其特征在于：所述辣根过氧化物酶标记/吖啶酯标记的链霉素的配制方法为：将含有NaCl和TAPS、Tris、MOPS、MES、磷酸盐中任一组分的纯化水作为缓冲液，加入1/1000~1/1500的链霉素-HRP或吖啶酯标记的链霉素，然后再加入牛血清白蛋白混合均匀，2-8℃保存待用。
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