[发明专利]调控辅助伴侣分子进而调控树突状细胞处于特定功能成熟状态的方法及应用

说明书

本发明涉及通过调控辅助伴侣分子进而调控树突状细胞处于特定功能成熟状态的方法及应用。本发明证实了辅助伴侣分子HSP70L1和DNAJC2在人单核细胞向树突状细胞分化中有一种特定表达的动态规律，在此基础上选取特定时间，促进它们的表达或者抑制它们的表达，能分别抑制和促进人单核来源树突状细胞的分化和功能成熟，利用该树突状细胞可进一步地获得免疫应答能力改变的T细胞。从而，可基于上述设计药物，应用于自身免疫性疾病和抗肿瘤和病毒等的治疗领域，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属生物技术领域，涉及调控辅助伴侣分子进而调控树突状细胞处于特定功能成熟状态的方法及应用。

背景技术

新合成的肽链离开核糖体需要穿越核糖体结构中的“隧道”。在隧道周边围绕着的是结合于核糖体的多个蛋白分子和核糖体RNA，它们发挥对多种新生肽链的“辅助翻译”功能，其中尤为重要的是分拣、折叠以及共价修饰新生多肽链。新生肽链从最初合成的线性到最终形成正确的空间构像，需要多种蛋白的辅助，这些蛋白被称为“伴侣”或“辅助伴侣”分子。

在结合核糖体的“伴侣”和“辅助伴侣”分子中，最为保守的是一个异二聚体复合物，在酵母中称为核糖体相关复合物(ribosome-associated complex，RAC)，在哺乳类细胞中简写为mRAC(mammalian RAC)。RAC和mRAC都是由一个含有J功能域的蛋白和一个热休克蛋白70(Heat-shock protein 70KD，HSP70)同源分子构成。含有J功能域的亚基在人类细胞中则命名为MPP11(M-phase phosphoprotein 11)，又名DNAJC2(Dnal homolog subfamilyC member 2)和ZRF-1(Zuotin-related factor 1)；HSP70同源分子的亚基在人类细胞中是本申请人上世纪90年代率先发现并命名的HSP70L1(HSP70-like molecule 1)(Wan T,ZhouX,Chen G,An H,Chen T,Zhang W,Liu S,Jiang Y,Yang F,Wu Y,Cao X.Novel heat shockprotein Hsp70L1activates dendritic cells and acts as a Th1polarizingadjuvant.Blood.2004；103(5):1747-54)，国际命名为HSPA14。

RAC和mRAC都是稳定的复合物，两个亚基间的相互作用并不受它们结合核苷酸的影响。目前对哺乳类mRAC功能的认识仍然有限，但是根据序列和结构的保守性，一般认为mRAC具有RAC相似的功能。

发明内容

在本发明的第一方面，提供一种使单核细胞向特定成熟状态树突状细胞分化的方法，所述方法选自：

(1)在单核细胞向树突状细胞分化早期提高HSP70L1和/或DNAJC2的表达，从而使其分化为低成熟的树突状细胞；或

(2)在单核细胞向树突状细胞分化中晚期或晚期抑制HSP70L1和/或DNAJC2的表达，从而促进其分化为功能成熟的树突状细胞。

在一个优选例中，所述的低成熟的树突状细胞表达共刺激分子和MHC分子的能力被抑制(即低水平地表达共刺激分子和MHC分子)；或所述的功能成熟的树突状细胞表达共刺激分子和MHC分子的能力被促进(即高水平地表达共刺激分子和MHC分子)。

在另一优选例中，所述的分化早期为：诱导分化培养起始后的第1～40小时，较佳地为6～36小时，更佳地为8～24小时，进一步更佳地为10～18小时；或所述的分化中晚期或晚期为诱导分化培养起始后的第80～150小时，较佳地为90～144小时，更佳地为96～130小时，进一步更佳地为96～120小时。

在另一优选例中，所述的提高HSP70L1和/或DNAJC2的表达包括：在细胞中过表达HSP70L1和/或DNAJC2；较佳地，以包含HSP70L1和/或DNAJC2基因表达盒的表达构建物在细胞中进行过表达；更佳地，所述的表达构建物为病毒载体。