[发明专利]异嗜性抗体阻断剂HBT-1及其制备方法在审
申请号: | 201811323396.8 | 申请日: | 2018-11-08 |
公开(公告)号: | CN109651508A | 公开(公告)日: | 2019-04-19 |
发明(设计)人: | 李永刚;李双林;王玉婷 | 申请(专利权)人: | 南京帆博生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/28 | 分类号: | C07K16/28;C07K1/36;C07K1/16;C07K1/34 |
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地址: | 210038 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 异嗜性抗体 阻断剂 互补决定区 制备 氨基酸序列 核苷酸序列 可变区 亲和性 轻链 重链 | ||
1.异嗜性抗体阻断剂HBT-1,其特征在于,包括重链和轻链,其中,重链的3个互补决定区CDR序列分别为,CDR1:Val-Gln-Ser-Ser-Ile-Thr,CDR2:Gln-Asp-Asp-Tyr-Ala-Tyr-Thr-Leu-Tyr,CDR3:Val-Tyr-Lys-Leu;轻链的3个互补决定区CDR序列分别为,CDR1:Gly-Asp-Val-Leu-Ser-Lys-Ser-Cys,CDR2:Lys-Asp-Arg-Phe,CDR3:His-Ile-Ile-Ser-Thr-Ser。
2.根据权利要求1所述的异嗜性抗体阻断剂HBT-1,其特征在于,所述重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述的异嗜性抗体阻断剂HBT-1,其特征在于,所述轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.根据权利要求1所述的异嗜性抗体阻断剂HBT-1,其特征在于,所述重链可变区核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.根据权利要求1所述的异嗜性抗体阻断剂HBT-1,其特征在于,所述轻链可变区核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
6.异嗜性抗体阻断剂HBT-1的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:准备试剂:平衡缓冲液、解离缓冲液、透析缓冲液、pH中和液,准备设备:ProteinG柱、低温高速离心机、天平、蠕动泵;
步骤2:冷冻的腹水在前一日10-15℃融化,用浸湿三蒸水的脱脂棉过滤去除油脂,过滤后的腹水4℃10000rPm离心30min收集上清;柱准备:填装Protein G填料,用纯化水洗涤5-10倍柱体积,去除乙醇;
步骤3:进行平衡、上样、平衡、解离、平衡、透析、回收,保存Protein A柱,清洗蠕动泵进样管;
步骤4:配制试剂:10mM Tris-NaCl、0.1M甘氨酸缓冲液、20mM Tris-NaCl、2M Tris、透析缓冲液。
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