[发明专利]异嗜性抗体阻断剂HBT-1及其制备方法

说明书

本发明提出一种异嗜性抗体阻断剂HBT‑1，包括其可变区的氨基酸序列和核苷酸序列，其中，重链的3个互补决定区CDR序列分别为，CDR1：Val‑Gln‑Ser‑Ser‑Ile‑Thr，CDR2：Gln‑Asp‑Asp‑Tyr‑Ala‑Tyr‑Thr‑Leu‑Tyr，CDR3：Val‑Tyr‑Lys‑Leu；轻链的3个互补决定区CDR序列分别为，CDR1：Gly‑Asp‑Val‑Leu‑Ser‑Lys‑Ser‑Cys，CDR2：Lys‑Asp‑Arg‑Phe，CDR3：His‑Ile‑Ile‑Ser‑Thr‑Ser,具备良好的亲和性。同时本发明还提出了异嗜性抗体阻断剂HBT‑1的制备方法。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，尤其是一种异嗜性抗体阻断剂HBT-1及其制备方法。

背景技术

阻断剂，也叫受体拮抗剂，指能与受体结合，并能阻止激动剂产生效应的一类配体物质。拮抗剂对相应受体有亲和性，但没有效能，从而抑制了激动剂对受体的作用。拮抗剂可以结合受体的活性位点，也可以结合别构位点，甚至单独结合通常没有生物调节作用的位点来达到效果。拮抗剂和受体结合性质不同，所以结合时间有长有短，结合的可逆性也有不同。

拮抗剂分为竞争性拮抗剂和非竞争性拮抗剂等类型。大部分药物拮抗剂都与内源性配体或底物竞争受体结合位点来达到效果。

受体是可被配体结合而激活的大型蛋白质分子。受体可以结合在细胞膜上，也可存在于细胞内部，比如在细胞核或线粒体中。受体在活性位点与配体以非共价键结合，一个受体上可以有多个结合不同配体的位点。配体和受体在活性位点或别构位点结合后，都可以调节受体的活性。拮抗剂可以通过结合活性位点、别构位点，或者单独结合通常不参与生物调节的位点来产生效果。

发明内容

本发明所解决的技术问题在于提供一种异嗜性抗体阻断剂HBT-1，包括其可变区的氨基酸序列和核苷酸序列，具备良好的亲和性。

实现本发明目的的技术解决方案为：

异嗜性抗体阻断剂HBT-1，包括重链和轻链，其中，重链的3个互补决定区CDR序列分别为，CDR1：Val-Gln-Ser-Ser-Ile-Thr，CDR2：Gln-Asp-Asp-Tyr-Ala-Tyr-Thr-Leu-Tyr，CDR3：Val-Tyr-Lys-Leu；轻链的3个互补决定区CDR序列分别为，CDR1：Gly-Asp-Val-Leu-Ser-Lys-Ser-Cys，CDR2：Lys-Asp-Arg-Phe，CDR3：His-Ile-Ile-Ser-Thr-Ser。

进一步的，本发明的异嗜性抗体阻断剂HBT-1，所述重链可变区氨基酸序列如SEQID NO.1所示。

进一步的，本发明的异嗜性抗体阻断剂HBT-1，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQID NO.2所示。

进一步的，本发明的异嗜性抗体阻断剂HBT-1，所述重链可变区核苷酸序列如SEQID NO.3所示。

进一步的，本发明的异嗜性抗体阻断剂HBT-1，所述轻链可变区核苷酸序列如SEQID NO.4所示。

本发明还提出异嗜性抗体阻断剂HBT-1的制备方法，包括以下步骤：

步骤1：准备试剂：平衡缓冲液、解离缓冲液、透析缓冲液、pH中和液，准备设备：Protein G柱、低温高速离心机、天平、蠕动泵；

步骤2：冷冻的腹水在前一日10-15℃融化，用浸湿三蒸水的脱脂棉过滤去除油脂，过滤后的腹水4℃10000rPm离心30min收集上清；柱准备：填装Protein G填料，用纯化水洗涤5-10倍柱体积，去除乙醇；

步骤3：进行平衡、上样、平衡、解离、平衡、透析、回收，保存Protein A柱，清洗蠕动泵进样管；