[发明专利]一种罗非鱼鱼皮免疫调节肽的制备方法

权利要求书

1.一种罗非鱼鱼皮免疫调节肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将鱼皮用清水清洗干净，浸入质量浓度为0.5-2%醋酸水溶液静置10-20min，取出鱼皮，在鱼皮的表面涂覆吸附剂进行吸附10-20h，使用清水清洗鱼皮，然后将鱼皮剪成碎片；

2）将鱼皮加入无水乙醇中在55-65℃下进行脱脂2-4h，经过水洗后重复脱脂1-2次，将鱼皮加入质量浓度为0.1-0.5% 的氢氧化钠水溶液中在室温下浸泡5-12h，水洗至中性，置于-20- -18℃下冷冻，备用；

3）将步骤2）中的冷冻鱼皮解冻后按料液比1:8-12g/mL加入水中，在80-90℃下保温1-2h，冷却至55-65℃，调节pH至5.5-6.5，加入木瓜蛋白酶进行酶解30-60min，置于沸水中进行灭活10-15min，冷却至室温，在4-6℃下以10000-12000r/min转速进行离心15-20min，收集上清液；

4）将上清液依次进行超滤、纳滤浓缩处理，然后经过冷冻干燥，即得；

所述步骤1）中吸附剂的制备方法包括以下步骤：

将预处理蟹壳粉置于质量浓度为5-10%醋酸水溶液中浸泡2-5h，水洗至中性，烘干，将烘干后的蟹壳在惰性气体的吹扫下，先以3-4℃/min升温速率升温至300-350℃，焙烧30-50min，然后以6-8℃/min升温速率升温至600-650℃，焙烧1-3h，得到多孔蟹壳粉；将多孔蟹壳粉加入高锰酸钾水溶液中进行活化20-40min，水洗后分离，干燥；将活化后的多孔蟹壳粉添加到海藻酸钠水溶液中，多孔蟹壳粉与海藻酸钠的质量比为1:0.4-0.6，然后加入三偏磷酸钠进行反应1-2h，三偏磷酸钠与海藻酸钠的质量比为1:3-6，经过分离、干燥得到吸附剂。

2.根据权利要求1所述的一种罗非鱼鱼皮免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中鱼皮与无水乙醇的料液比为1:3-5g/mL。

3.根据权利要求1所述的一种罗非鱼鱼皮免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中木瓜蛋白酶的重量为鱼皮重量的4-8%。

4.根据权利要求1所述的一种罗非鱼鱼皮免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述高猛酸钾水溶液的浓度为0.5-2wt%。

5.根据权利要求1所述的一种罗非鱼鱼皮免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述海藻酸钠水溶液的浓度为1-5wt%。

6.根据权利要求1所述的一种罗非鱼鱼皮免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述预处理蟹壳粉的制备方法包括以下步骤：

将蟹壳粉碎后得到蟹壳粉，将蟹壳粉与多巴胺按质量比1:0.25-0.5加入水中，蟹壳粉与水的质量体积比为1:30-40g/mL，升温至45-60℃，然后加入戊二醛，戊二醛与多巴胺的摩尔比为1:1-2，搅拌反应1-2h，搅拌速率控制在80-120r/min，经过过滤、水洗后将蟹壳粉在50-70℃下干燥1-4h，得到预处理蟹壳粉。