[发明专利]一种表达禽流感H9N2病毒HA蛋白的新城疫病毒载体疫苗株有效
申请号: | 201811329050.9 | 申请日: | 2018-11-09 |
公开(公告)号: | CN109439687B | 公开(公告)日: | 2022-01-04 |
发明(设计)人: | 李明义;李朝阳;孙化露;刘阳;单学强;于泽坤;李思菲;栾志舫;只勇;孙娜娜;颜瑞娟;胡秀香 | 申请(专利权)人: | 山东信得科技股份有限公司;青岛信得药业有限公司 |
主分类号: | C12N15/86 | 分类号: | C12N15/86;C12N7/01;C12N15/44;C12N15/66;A61K39/17;A61P31/14 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 262200 山东省潍坊市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 表达 禽流感 h9n2 病毒 ha 蛋白 新城 疫病 载体 疫苗 | ||
1.一种表达禽流感H9N2病毒HA蛋白的新城疫病毒株的构建方法,其特征在于,所述的构建方法如下:
1)构建新城疫病毒NDV全基因组转录质粒,所述的转录质粒,其中将H9N2的HA蛋白编码基因插入到新城疫病毒株NDV基因组的P基因与M基因之间;所述的HA蛋白的核苷酸序列为SEQ ID NO:2;
2)构建用于表达新城疫病毒NP蛋白、P蛋白和L蛋白的辅助重组质粒;
3)将构建的新城疫病毒NDV全基因组转录质粒和3个辅助重组质粒共转染表达T7RNA聚合酶的细胞系DF1-T7,培养获得表达禽流感H9N2病毒HA蛋白的新城疫病毒株。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的将HA蛋白编码基因插入到新城疫病毒株NDV基因组的P基因与M基因之间,其一种方法是在新城疫病毒株NDV基因组的第3171nt之后引入Pme I酶切位点,再将H9N2的HA蛋白编构建码基因插入到酶切位点处。
3.一种表达禽流感H9N2病毒HA蛋白的新城疫病毒株,其特征在于,所述的新城疫病毒株是用权利要求1-2任一项所述的方法构建的。
4.权利要求3所述的新城疫病毒株在制备疫苗中的应用。
5.一种重组疫苗,其特征在于,所述的疫苗其中使用的抗原为权利要求3所述的新城疫病毒株。
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