[发明专利]细胞保存液及使用细胞保存液保存细胞的方法

说明书

本发明公开了一种细胞保存液，包括甲醇、proclin300、EDTA、NaCl、乙酸、白蛋白、葡萄糖、生理盐水以及氯化铬，其特征在于：由如下重量份的组分制备而得：甲醇：15.00％‑35.00％、proclin300：0.20％‑0.35％、EDTA：0.10％‑0.52％、NaCl：0.10％‑0.23％、乙酸：53.20％‑68.70％、白蛋白：2.30％‑25.0％、葡萄糖：0.10％‑1.00％，生理盐水0.5‑0.9％以及氯化铬0.1％‑1％。使用该细胞保存液保存细胞的方法，在实际使用时，可以对采集后的细胞进行良好的保存，能够完全保持原有细胞的形态、活性以及结构特征，不会发生细胞自溶或胀裂的现象，另外，该细胞保存液的成分简单，配置成本低廉，使用简单，操作方便，适于推广使用。

技术领域

本发明涉及细胞保存技术领域，具体为细胞保存液及使用细胞保存液保存细胞的方法。

背景技术

目前，正常人体活细胞在脱落前是具有生理学功能、生物学活性及完整的细胞形态，在生物学研究和医学检验中具有重要的价值。若是离开人体，脱落的细胞其生理学功能、生物学活性及细胞形态结构也将发生改变，因此，当细胞从人体中脱离后，需要借助细胞保存液对脱离人体后细胞的形态、活性以及结构进行维持。

但是目前常用的细胞保存液不仅成分复杂，而且功能较为单一，另外，在使用细胞保存液对细胞进行保存时，由于操作的方法不规范，进而到细胞在进行保存的过程中，存活率大大降低，为此，我们提出了一种细胞保存液及使用细胞保存液保存细胞的方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种细胞保存液及使用细胞保存液保存细胞的方法，可以有效解决背景技术中细胞保存液不仅成分复杂，而且功能较为单一，另外，在使用细胞保存液对细胞进行保存时，由于操作的方法不规范，进而到细胞在进行保存的过程中，存活率大大降低的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种细胞保存液，包括甲醇、proclin300、EDTA、NaCl、乙酸、白蛋白、葡萄糖、生理盐水以及氯化铬，其特征在于：由如下重量份的组分制备而得：甲醇：15.00％-35.00％、proclin300：0.20％-0.35％、EDTA：0.10％-0.52％、NaCl：0.10％-0.23％、乙酸：53.20％-68.70％、白蛋白：2.30％-25.0％、葡萄糖：0.10％-1.00％，生理盐水0.5-0.9％以及氯化铬0.1％-1％。

作为本发明的一种优选技术方案，由如下重量份的组分制备而得：甲醇：18.00％-33.00％、proclin300：0.28％-0.30％、EDTA：0.22％-0.42％、NaCl：0.15％-0.20％、乙酸：55.38％-60.21％、白蛋白：10.30％-18.91％、葡萄糖：0.34％-0.85％，生理盐水0.7-0.8％以及氯化铬0.1％-0.5％。

作为本发明的一种优选技术方案，由如下重量份的组分制备而得：甲醇：25％、proclin300：0.29％、EDTA：0.39％、NaCl：0.18％、乙酸：58.45％、白蛋白：15.35％、葡萄糖：0.56％、生理盐水0.61％以及氯化铬0.3％。

作为本发明的一种优选技术方案，向上述细胞保存液中添加质控细胞，质控细胞为Hela细胞，所加入质控细胞的浓度为2×10⁶个/ml，100ul，温度控制在2-8℃的范围内，保存七天后，细胞数量与刚加入细胞时的数量相对偏差不大于40％，上述细胞保存液的PH应控制在4.0-7.0的范围内

使用上述任意一种细胞保存液保存细胞的方法，包括如下步骤：在细胞采集前24小时，从-20℃冰箱中取出上述细胞保护液，放入4℃冰箱中融化，保存液保存浓度为2×106个/ml的Hela细胞液的细胞数量批内cv值不超过10％，批间cv值不超过15％；