[发明专利]一种缓释疫苗载体及其制备方法

说明书

本发明提供一种基于油佐剂和磷脂的缓释疫苗载体，并提供该疫苗的制备方法。本发明采用一种简单的制备方法，选取固态磷脂和油佐剂，亦可选用其他类型佐剂，加入抗原，制备成流动性良好的、长时间缓释的疫苗传递系统。所述疫苗系统具有生物相容性好、不良反应小、缓释效果显著、引起的抗体滴度高、血清抗体持续时间长等特点，适用于皮下注射、肌肉注射、外用给药的给药形式，且包载抗原的量可根据所需剂量进行调节，具有广阔的疫苗应用前景。

技术领域

本发明涉及一种长效、发生相变的疫苗传递系统，具体涉及以磷脂，不同浓度的乙醇溶液，可选用油佐剂，和/或其它免疫佐剂，制备成的高浓度磷脂缓释疫苗，为医药技术领域。

背景技术

当机体遇到外来抗原时，它会产生免疫反应来中和抗原，同时也会通过形成免疫记忆，来为以后再次遇到该种抗原做准备。简单来说，存在于脾或淋巴系统中的幼稚B细胞，通过B细胞受体与抗原结合，在生发中心增殖，并发生体细胞超变，使B细胞对抗原表位具有特异性。这些B细胞一部分成为浆细胞，产生抗原特异性抗体；一部分成为记忆B细胞，在该抗原再次出现时做出应答。随着时间推进，短寿命的浆细胞会减少，因此循环抗体滴度也会相应降低。当抗原第二次出现时，抗原特异的记忆B细胞会迅速增殖，然后分化成浆细胞产生抗体，来阻止病毒或细菌感染。在这个过程中，某些B细胞会保持记忆状态，这样在之后再遇到相应抗原时，会继续增强对于该抗原的亲和性，进而产生更有效的应答。初次抗原反应需要10-28天达峰，而二次达峰时间仅需要2-7天，因此短时间内，在抗原指数型生长时前，可以达到有效的预防感染的作用。

疫苗被认为是预防传染性疾病最有效、最经济的方式。但大多数疫苗都是没有缓释抗原效果的，因此需要进行多次疫苗免疫，才能达到所追求的长效。但完成这种多次免疫，在发展中国家里是很有挑战性的，因为发展中国家卫生保健渠道有限，资金短缺，所以这对进行多次接种的疫苗，完全发挥免疫作用带来很大的阻碍。此外，对于注射疫苗来说，多次免疫带来的疼痛问题、费用问题，也为接种者对疫苗的依从性带来挑战。

如果这些疫苗体系仅需要一次给药，就可以长时间释放抗原，进而引起初级、次级免疫应答，从而引起长时间的抗原特异性的免疫记忆，这将会为疫苗的广泛使用带来极大的推动。与普通疫苗相比，缓释疫苗最大的优势，在于延长机体免疫应答的持续时间，且增强了疫苗效果。尽管传统疫苗在按照计划进行免疫时，会取得好的效果，但这种多次免疫的方式，在许多医疗条件有限的发展中国家是不切实际的。从接种者角度来看，缓释疫苗，因为免疫所需要的注射次数和到卫生保健场所的次数减少了，所以也降低了疼痛感、提高了简便性。从费用方面来看，单次给药的缓释疫苗也具有很大优势的。

对于单次免疫的即可长效疫苗来说，最主要的研究工作是缓释抗原的体系。在该体系中，抗原分散在缓释基质中，然后随着基质降解，抗原缓慢释放。通过这种基质逐渐降解的方式，允许部分抗原隐蔽在免疫系统之外，直到足够的降解完成，抗原才会完全释放。因此，我们尝试找到一种合适的剂型，研制出一种仅需单次免疫，在体内就能够引起长期抗体水平，且制备简单，具有良好安全性的长效疫苗。

发明内容

本发明的目的之一，提供一种缓释的疫苗传递系统。

专利文献201110420104.4提供了一种用于传递药物、直接治疗相关疾病的磷脂原位相变凝胶的传递系统，该体系由磷脂、乙醇等物质组成。但该体系并没有涉及到油佐剂，和/或其它免疫佐剂的使用，也没有将该体系作为缓释疫苗应用于抗原的递送。而本发明通过引入新的佐剂成分与抗原成分，以原位相变磷脂作为基本载体，将其作为疫苗应用，产生了具有长时间抗原缓释、引起机体长时间免疫应答反应的疫苗系统。

磷脂与乙醇混合，可以得到一种澄清透明、流动性很好的液体。将抗原与该磷脂的乙醇溶液混合，注入体内，制剂中的乙醇会析出，而剩下的磷会固化，通过机体缓慢降解吸收固化的磷脂，制剂中的抗原会缓慢释放，引起机体针对抗原的特异性免疫应答。而当体系中引入佐剂成分后，会进一步增强对机体免疫系统的刺激，从而成为有效、长效的相变疫苗。