[发明专利]一种环糊精葡萄糖基转移酶的突变体及其应用有效
| 申请号： | 201811330680.8 | 申请日： | 2018-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN109456950B | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;宿玲恰;杜立 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/12;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 环糊精 葡萄 糖基转移酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种环糊精葡萄糖基转移酶的突变体，其特征在于，将来源于环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)的环糊精葡萄糖基转移酶的第234位的氨基酸进行取代得到的突变体；所述来源于环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)的环糊精葡萄糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
所述突变体是将第234位置的甲硫氨酸(Met)变成异亮氨酸(Ile)，突变体命名为M234I；
或，所述突变体是将第234位置的甲硫氨酸(Met)变成丙氨酸(Ala)，突变体命名为M234A；
或，所述突变体是将第234位置的甲硫氨酸(Met)变成亮氨酸(Leu)，突变体命名为M234L；
或，所述突变体是将第234位置的甲硫氨酸(Met)变成缬氨酸(Val)，突变体命名为M234V。
2.编码权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶的突变体的基因。
3.携带权利要求2所述环糊精葡萄糖基转移酶的突变体的基因的载体或重组细胞。
4.制备权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶的突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)根据确定的突变位点，设计定点突变的突变引物，以携带环糊精葡萄糖基转移酶基因的载体为模板进行定点突变；构建含有编码突变体的基因的质粒载体；
(2)将突变体质粒转化进宿主细胞；
(3)挑选阳性克隆进行发酵培养，离心，收集发酵上清液即为突变体环糊精葡萄糖基转移酶的粗酶液。
5.权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶的突变体在生产海藻糖中的应用。
6.权利要求2所述环糊精葡萄糖基转移酶的突变体的基因在生产海藻糖中的应用。
7.权利要求3所述环糊精葡萄糖基转移酶的突变体的基因的载体或重组细胞在生产海藻糖中的应用。
8.生产海藻糖的酶制剂，其特征在于，包括权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶的突变体。
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