[发明专利]一种有助于体外获得Th22细胞的组合物及其用途有效
申请号: | 201811330774.5 | 申请日: | 2018-11-09 |
公开(公告)号: | CN109439626B | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
发明(设计)人: | 杨骥;李明 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/17;A61P37/02;A61P29/00;A61P25/00;A61P19/02;A61P19/08;A61P1/16;A61P3/10;A61P9/10;A61P3/06;A61P17/06;A61P17/00 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹;王婧 |
地址: | 200032 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 有助于 体外 获得 th22 细胞 组合 及其 用途 | ||
1.一种有助于体外获得Th22细胞的组合物,其特征在于,所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物包括:
幼稚性B细胞,以及抗CD3抗体1.8-2.2μg/ml、抗CD28抗体1.8-2.2μg/ml、TGF-β0.5-5ng/ml、IL-6 20-100ng/ml、IL-1β10-20ng/ml、抗IL-4抗体8-12μg/ml、抗IFN-γ抗体8-12μg/ml、抗IL-2抗体8-12μg/ml,抗IgM抗体1.8-2.2μg/ml和抗CD40L抗体1.8-2.2μg/ml;
或包括:Breg细胞,以及抗CD3抗体1.8-2.2μg/ml、抗CD28抗体1.8-2.2μg/ml、TGF-β0.5-5ng/ml、IL-6 20-100ng/ml、IL-1β10-20ng/ml、抗IL-4抗体8-12μg/ml、抗IFN-γ抗体8-12μg/ml和抗IL-2抗体8-12μg/ml。
2.如权利要求1所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物,其特征在于,所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物包括:
幼稚性B细胞,以及抗CD3抗体2μg/ml、抗CD28抗体2μg/ml、TGF-β0.5-5ng/ml、IL-6 20-100ng/ml、IL-1β10-20ng/ml、抗IL-4抗体10μg/ml、抗IFN-γ抗体10μg/ml、抗IL-2抗体10μg/ml、抗IgM抗体2μg/ml和抗CD40L抗体2μg/ml;
或包括:Breg细胞,以及抗CD3抗体2μg/ml、抗CD28抗体2μg/ml、TGF-β0.5-5ng/ml、IL-620-100ng/ml、IL-1β10-20ng/ml、抗IL-4抗体10μg/ml、抗IFN-γ抗体10μg/ml和抗IL-2抗体10μg/ml。
3.如权利要求1所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物,其特征在于,所述的幼稚性B细胞或Breg细胞的个数为1×106-5×106个/ml。
4.权利要求1-3中任一项所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物在体外获得Th22细胞中的用途。
5.一种体外获得Th22细胞的方法,其特征在于,应用权利要求1-3中任一项所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物,具体步骤包括:向幼稚性T细胞的培养液中加入上述任一组合物进行诱导分化。
6.一种体外获得Th22细胞的方法,其特征在于,应用权利要求1或3中任一项所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物,具体步骤包括:将幼稚性B细胞在含有抗IgM抗体1.8-2.2μg/ml和抗CD40L抗体1.8-2.2μg/ml的培养基中预先培养1-3天,诱导向Breg细胞分化,然后与T细胞共培养,加入抗CD3抗体1.8-2.2μg/ml、抗CD28抗体1.8-2.2μg/ml、TGF-β0.5-5ng/ml、IL-620-100ng/ml、IL-1β10-20ng/ml、抗IL-4抗体8-12μg/ml、抗IFN-γ抗体8-12μg/ml、抗IL-2抗体8-12μg/ml,继续培养。
7.一种体外获得Th22细胞的方法,其特征在于,应用权利要求1-3中任一项所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物,具体步骤包括:将幼稚性B细胞在含有抗IgM抗体2μg/ml和抗CD40L抗体2μg/ml的培养基中预先培养2天,诱导向Breg细胞分化,然后与T细胞共培养,加入抗CD3抗体2μg/ml、抗CD28抗体2μg/ml、TGF-β0.5ng/ml、IL-6 50ng/ml、IL-1β10ng/ml、抗IL-4抗体10μg/ml、抗IFN-γ抗体10μg/ml、抗IL-2抗体10μg/ml,继续培养。
8.权利要求1-3中任一项所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物在制备治疗自身免疫性疾病或免疫炎症性疾病药物中的应用。
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