[发明专利]一种有助于体外获得Th22细胞的组合物及其用途

说明书

本发明提供了一种有助于体外获得Th22细胞的组合物及其用途，所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物，其特征在于，包括：幼稚性B细胞或Breg细胞，以及TGF‑β、IL‑6、IL‑1β、抗IL‑4抗体、抗IFN‑γ抗体、抗IL‑2抗体、抗CD3抗体和抗CD28抗体。本发明扩增的Th22细胞可用来治疗一些自身免疫性疾病，如红斑狼疮、皮肌炎、血管炎、干燥综合征、硬皮病、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、多发性硬化、自身免疫性肝炎；慢性炎症性疾病，如糖尿病、冠心病、高脂血症、湿疹、白癜风、异位性皮炎、扁平苔藓等。

技术领域

本发明涉及体外Breg细胞联合细胞因子体外诱导获得Th22细胞的方法，涉 及一种有助于体外获得Th22的组合物、方法及其在红斑狼疮、类风湿性关节炎、 硬皮病等炎症性疾病中的应用。

背景技术

调节性B细胞(Breg)是一群具有免疫调节作用的B细胞，因其膜标记为 CD19⁺CD5⁺CD1d^high并主要分泌抑制性的细胞因子IL-10，故又称为B10细胞。 Breg细胞具有免疫抑制作用，可抑制其他效应性T细胞的增殖和分泌。基于Breg 细胞的负向调控作用，因此有潜力用于治疗自身免疫性疾病如红斑狼疮(SLE)、 胶原诱导关节炎(CIA)、实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)、慢性结肠炎(CC) 等。但Breg细胞治疗自身免疫性疾病的具体机制并不清楚，进而限制了其临床 的使用。

Th22细胞是一群分泌IL-22的CD4+T细胞，Th17细胞也可以分泌部分的IL-22，TNF-α和IL-6可具有促进Th22分化的作用，其可通过分泌的IL-22起负向的免疫调 节作用，在自身免疫性疾病发病过程可能发挥调控免疫反应的作用。但在自身免 疫性疾病病情活动和发病过程中，Th22细胞减少，分泌IL-22的量减少，进而不 能控制亢进的自身免疫炎症损伤。但Th22细胞的体外诱导分化和扩增较难，目前 并没有找到Th22细胞有效的体外扩增方法。如能找到体外扩增Th22的方法，可 帮助快捷和高效的扩增Th22细胞，扩增后的Th22可用于自身免疫性疾病的细胞 治疗。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种有助于体外获得Th22细胞的组合物。

本发明的另一目的是提供上述组合物的用途。

为了达到上述目的，本发明提供了一种有助于体外获得Th22细胞的组合物， 其特征在于，包括：幼稚性B细胞或Breg细胞，以及TGF-β、IL-6、IL-1β、抗 IL-4抗体、抗IFN-γ抗体、抗IL-2抗体、抗CD3抗体和抗CD28抗体。

优选地，所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物还包括抗IgM抗体和 抗CD40L抗体。

优选地，所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物包括：

幼稚性B细胞，以及抗CD3抗体1.8-2.2μg/ml、抗CD28抗体1.8-2.2μg/ml、 TGF-β0.5-5ng/ml、IL-6 20-100ng/ml、IL-1β 10-20ng/ml、抗IL-4抗体8-12 μg/ml、抗IFN-γ抗体8-12μg/ml、抗IL-2抗体8-12μg/ml，抗IgM抗体1.8-2.2 μg/ml、抗CD40L抗体1.8-2.2μg/ml；

或包括：Breg细胞，以及抗CD3抗体1.8-2.2μg/ml、抗CD28抗体1.8-2.2 μg/ml、TGF-β 0.5-5ng/ml、IL-6 20-100ng/ml、IL-1β 10-20ng/ml、抗IL-4 抗体8-12μg/ml、抗IFN-γ抗体8-12μg/ml、抗IL-2抗体8-12μg/ml。

更优选地，所述的有助于体外获得Th22细胞的组合物包括：