[发明专利]一种齿瓣石斛精制多糖及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种齿瓣石斛精制多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将齿瓣石斛原料粉碎，过40目筛网，得到粉状的齿瓣石斛，备用；

2）将粉状的齿瓣石斛置于容器中，加齿瓣石斛重量40倍量的水，100℃～105℃保温提取3小时，过滤得滤液，滤渣再如此重复提取一次，过滤得滤液，合并两次提取液；

3）将提取液在60℃～70℃温度下减压浓缩成浓缩液；

4）在浓缩液中添加4倍量的无水乙醇使药液含醇量达到80%，醇沉，得沉淀；

所述的药液含醇量是指乙醇的体积比上浓缩液加上乙醇的体积；

5）将沉淀用水溶解，形成沉淀溶解液，用体积比4：1的氯仿-正丁醇的混合液萃取，体积比4：1的氯仿-正丁醇的混合液用量与沉淀溶解液的体积比为1:4，最上层液体加同样体积的氯仿-正丁醇混合液，重复上述操作6次，最后取最上层液体在50℃～60℃温度下减压浓缩，冷冻干燥，得齿瓣石斛粗多糖；

6）将齿瓣石斛粗多糖用水溶解，上样DEAE-Sepharose Fast Flow柱，用超纯水洗脱，自动收集器收集，蠕动泵流速为1mL/min，8min收集一管，苯酚硫酸法测定吸光度，每个梯度洗至无糖被检出，根据吸收峰合并相同流份，在50℃～60℃温度下减压浓缩，再以流动的蒸馏水透析24 h，透析膜截留分子量7000，冷冻干燥，得齿瓣石斛半精制多糖；

7）将齿瓣石斛半精制多糖用水溶解，上样Sephadex G-200柱，用超纯水洗脱，自动收集器收集，蠕动泵流速为1mL/min，11min收集一管，苯酚硫酸法测定吸光度，每个梯度洗至无糖被检出，根据吸收峰合并相同流份，在50℃～60℃温度下减压浓缩，再以流动的蒸馏水透析24 h，透析膜截留分子量7000，冷冻干燥，得齿瓣石斛精制多糖；

8）齿瓣石斛精制多糖的分子量为9.5×10⁴，其单糖组成为甘露糖和葡萄糖，葡萄糖与甘露糖的摩尔比为1：15.85。

2.根据权利要求1所述的制备方法制备的齿瓣石斛精制多糖在制备功能性食品和增强免疫作用和缓解体力疲劳的药物中的应用，其特征在于，所述的功能性食品和增强免疫作用和缓解体力疲劳的药物，有效成分为质量比1:1的齿瓣石斛精制多糖和人参皂苷Rg1；或者，有效成分为齿瓣石斛精制多糖、人参皂苷Rg1、阿拉伯糖和半乳糖，质量比为1：1：0.4：0.2。