[发明专利]基于混合填料的抗体纯化方法

说明书

本发明涉及蛋白质分离技术领域，尤其是涉及一种基于混合填料的抗体纯化方法。所述基于混合填料的抗体纯化方法，包括如下步骤：利用混合填料层析柱对含目标抗体粗品进行纯化，混合填料包括阴离子交换层析介质和疏水层析介质。本发明的抗体纯化方法，通过将阴离子交换层析介质与疏水层析介质混合使用得到混合填料，采用混合填料一步法对抗体进行精纯处理，可以与蛋白产生多种相互作用，充分利用混合填料吸附容量大、选择性好等优点，分离效率高，简化分离步骤，降低分离成本，目标抗体回收率高，能有效的去除高聚体等杂质，解决了现有技术中无法兼顾目标抗体纯度和回收率的问题。

技术领域

本发明涉及蛋白质分离技术领域，尤其是涉及一种基于混合填料的抗体纯化方法。

背景技术

抗体是能与抗原特异性结合的一类蛋白，参与了机体的免疫过程，在医药、食品、环境和农业等领域有着重要的应用。特别是医药领域，单克隆抗体具有专一性强、治疗效果显著和毒副作用小等优点，广泛应用于自身免疫性疾病、癌症等重大疾病的诊断和治疗。随着市场需求的显著增加，抗体制备生产的过程越来越受到关注。

抗体药物的下游制备工艺主要包括抗体捕获和精制纯化两个阶段。发酵液上清液经亲和层析后，产品纯度一般可达到90％的单体纯度。但是，药用抗体纯度要求高，抗体经捕获后，产品成分仍较复杂，含DNA、聚体和宿主细胞蛋白等多种杂质，一般需再经阴离子交换、阳离子交换层析和疏水作用层析进一步除杂。但是，精制纯化阶段需要各种柱层析法联用，遇到诸如纯化过程复杂、步骤多、或者成本高等问题。因此，需要研究抗体精制纯化的新方法。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于混合填料的抗体纯化方法，该方法通过将阴离子交换层析介质与疏水层析介质混合使用得到混合填料，采用混合填料一步法对抗体进行精纯处理，充分利用混合填料吸附容量大、选择性好等优点，分离效率高，简化分离步骤，降低分离成本。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

基于混合填料的抗体纯化方法，包括如下步骤：

利用混合填料层析柱对含目标抗体粗品进行纯化，混合填料包括阴离子交换层析介质和疏水层析介质。

本发明的抗体纯化方法，通过将阴离子交换层析介质与疏水层析介质混合使用得到混合填料，采用混合填料一步法对抗体进行精纯处理，充分利用混合填料吸附容量大、选择性好等优点，分离效率高，简化分离步骤，降低分离成本。

采用混合填料，可以与蛋白产生多种相互作用，较单一的阴离子交换作用或疏水作用，目标抗体回收率高，能有效的去除高聚体等杂质，解决了现有技术中无法兼顾目标抗体纯度和回收率的问题。

综上，与现有技术相比，本发明的抗体纯化方法，操作工序简单，通过一步法即可实现对目标抗体的精纯，且吸附容量大、处理量高，抗体纯度高，回收率高。

优选的，阴离子交换层析介质和疏水层析介质的体积比为5﹕1～1﹕5，优选3﹕1～1﹕3。

优选的，阴离子交换层析介质包括POROS 50HQ、Capto Q和Capto Q ImpRes中的任一种或多种，优选为POROS 50HQ。

优选的，疏水层析介质包括Capto Butyl ImpRes、Capto Octyl和POROS Ethyl中的任一种或多种，优选为Capto Butyl ImpRes。