[发明专利]一种海洋环境来源的几丁质酶及其基因

权利要求书

1.一种几丁质酶，其特征在于：所述几丁质酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.编码权利要求1所述几丁质酶的基因，其核苷酸序列如 SEQ ID NO.1所示。

3.含有权利要求2所述的编码几丁质酶的基因的重组载体，其特征在于：所述载体是大肠杆菌质粒或酵母质粒。

4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于：载体为pET28a(+)-Chitinase或pPIC9k-Chitinase。

5.含有权利要求2所述编码几丁质酶的基因的细胞，其特征在于：所述细胞为大肠杆菌细胞或酵母细胞；所述细胞由权利要求3所述重组载体转化而得。

6.权利要求3所述重组载体的制备方法，其特征在于：采用权利要求2所述基因序列经SacI和XhoI双酶切后与SacI和XhoI双酶切的pET28a(+)载体连接，得到大肠重组表达载体pET28a(+)-Chitinase或采用权利要求2所述的编码几丁质酶的基因序列经SacI和 XhoI双酶切后与SacI和 XhoI双酶切的pPIC9k载体连接，得到酵母重组表达载体pPIC9k-Chitinase。

7.权利要求1所述的几丁质酶的制备方法，其特征在于：培养所述包含编码权利要求1所述的几丁质酶的基因的细胞或经含有编码权利要求1所述的几丁质酶的基因的重组载体转化的细胞，诱导几丁质酶的表达，收获表达产物，并通过镍柱纯化得到了纯酶形式的目的蛋白。