[发明专利]一种用于水产品中利福平药物残留的测定方法

说明书

本发明公开了一种用于水产品中利福平药物残留的测定方法，采用改进的QuEChERS方法进行样品前处理，对样品进行脱水后再加入提取剂进行提取，提取液经氮吹复溶后，加入吸附净化剂进行基质固相分散净化，在InertSustainSwift C18色谱柱上以含0.05％甲酸的乙酸铵水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱分离，再采用电喷雾电离正离子多反应监测模式测定，内标法定量分析，通过QuEChERS法和超高效液相色谱串联质谱法的有效结合，建立了一种用于水产品中利福平药物残留的测定方法，该测定方法中的样品前处理方法操作简单，灵敏度高，准确性好，稳定性好，适用于水产品中利福平药物残留的确证和定量分析，为利福平药物违规使用的监管提供便捷、有效的技术支持。

技术领域

本发明属于水产品中利福平的检测技术领域，具体涉及一种用于水产品中利福平药物残留的测定方法。

背景技术

利福平是从利福霉素B中得到的一种半合成抗生素，它通过抑制细菌中DNA转录合成RNA，从而起到杀灭细菌的作用。通常情况下，利福平可用于治疗结核病、肠球菌感染等，特别是作为抗结核药物在全球得到了广泛应用。利福平未批准用于水产动物，但其在实际水产养殖中被广泛使用。据有关研究学者对一些地区中部分水产养殖致病菌进行了耐药分析，发现多种菌株对利福平药物呈现出30％～80％不同程度的耐药率，再加上利福平抗菌谱广，价格低廉，使得其在水产养殖业中可能存在盲目大量投放的情况，以致诱导菌株产生抗性。

然而，如果药物仍残留于食用水产动物机体中，通过食物链在人体内蓄积，对人类健康产生危害，其耐药性也有转移扩散到人体的风险，对消费者的健康构成很大的威胁。

QuEChERS法作为一种快速、简单、便宜、有效、可靠和安全的样品前处理技术，最初应用于农药残留中，而近年来已越来越多的学者研究将其应用于各种抗生素和激素的前处理技术中。其原理与高效液相色谱(HPLC)和固相萃取(SPE)相似，都是利用吸附剂填料与基质中的杂质相互作用，吸附杂质从而达到除杂净化的目的。

目前，我国尚未建立关于利福平在水产品或相关动物性食品中的检测技术标准。近年来，相关文献报道关于在生物基质中检测利福平的，大多是采用高效液相色谱法或高效液相色谱-串联质谱法检测血浆中利福平的药物浓度。因此，有必要建立一种用于水产品中利福平药物残留的测定方法，为利福平药物违规使用的监管提供便捷、有效的技术支持。

发明内容

本发明的目的在于采用经济、简单、快速、高效的且经改进的QuEChERS样品前处理技术结合超高效液相色谱－串联质谱法，建立一种用于水产品中利福平药物残留的测定方法，为利福平药物违规使用的监管提供便捷、有效的技术支持。

本发明所采取的技术方案是：一种用于水产品中利福平药物残留的测定方法，所述测定方法是采用改进的QuEChERS方法进行样品前处理，对样品进行脱水后再加入提取剂进行提取，提取液经氮吹复溶后，加入吸附净化剂进行基质固相分散净化，在InertSustainSwift C18色谱柱上以含0.05％甲酸的乙酸铵水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱分离，再采用电喷雾电离正离子多反应监测模式测定，内标法定量分析。

作为上述方案的进一步改进，所述样品包括罗非鱼、南美对白虾、中华鳖、濑尿虾、乌鳢、草鱼。

作为上述方案的进一步改进，所述对样品进行脱水时用到的脱水剂包括无水硫酸钠和无水硫酸镁中的一种或两种。

作为上述方案的进一步改进，所述提取剂包括乙腈和二氯甲烷的混合溶液，所述混合液中的二氯甲烷的体积占比为20％～60％。

作为上述方案的进一步改进，所述吸附净化剂为C18与PSA的混合物。

作为上述方案的进一步改进，所述C18的用量为80mg～160mg。

作为上述方案的进一步改进，所述PSA的用量为50mg～120mg。