[发明专利]一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法

权利要求书

1.一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法，包括以下步骤：

（1）在灭菌培养皿中加入灭菌石英砂，用蒸馏水浸润石英砂，于培养皿内石英砂上均匀摆放微孔滤膜圆片，用移液枪转移丛枝菌根真菌（AMF）孢子至微孔滤膜表面，每片微孔滤膜转移1个外观饱满的新鲜收集的孢子，盖好皿盖，20-28 ℃暗培养；

（2）取白三叶草种子，浓硫酸表面消毒5-10min无菌水冲洗后20-28℃催芽；

（3）准备河沙，于烘箱内灭菌，将灭菌的河沙装入花盆中待用；

（4）打开皿盖，于解剖镜下检查孢子萌发情况，将萌发的孢子连同微孔滤膜圆片一起转移至折叠的浸湿滤纸内，折叠的浸湿滤纸是将滤纸对折两次后用灭菌蒸馏水浸湿，同时转接一颗刚长出真叶的白三叶草幼苗；

（5）用1/2强度的霍格兰营养液浸润花盆中的河沙，将携带孢子和白三叶草的滤纸片垂直放入花盆的河沙中；

（6）白三叶草生长1个月后，将滤纸取出，展开滤纸，于解剖镜下检查AMF侵染情况；

（7）将成功侵染的白三叶草移栽回花盆，继续培养4个月后收获。

2.如权利要求1所述的一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法，其中：微孔滤膜圆片为微孔滤膜用打孔器制取。

3.如权利要求1所述的一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法，其中：滤纸、玻璃培养皿、蒸馏水和石英砂与微孔滤膜圆片一起高压蒸汽灭菌。