[发明专利]鹿胎盘活性蛋白及其提取方法和应用有效
| 申请号： | 201811340286.2 | 申请日： | 2018-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN109627282B | 公开（公告）日： | 2023-06-30 |
| 发明（设计）人： | 蔡勇;金景姬;李富强;隋毅 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 李冉 |
| 地址： | 130000 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鹿胎 盘活 蛋白 及其 提取 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.鹿胎盘活性蛋白在制备促进间充质干细胞干性维持的药物中的应用，其特征在于，所述鹿胎盘活性蛋白的提取方法包括以下步骤：
(1)取鹿胎盘进行预处理；
(2)将步骤(1)预处理后的鹿胎盘于-30℃冷冻后切碎，加入含蛋白酶抑制剂的生理盐水，其中，鹿胎盘与含蛋白酶抑制剂的生理盐水的质量体积比为1:6，蛋白酶抑制剂为苯甲基硫氟化物，然后制成匀浆；
(3)将所述匀浆置于-25～70℃完全冻结，然后再在25～37℃的水中迅速溶化，重复1-3次；
(4)将步骤(3)处理后的所述匀浆进行超声破碎细胞，然后14000g离心分离，收取上清液；
(5)将所述上清液冷却至4℃，加入所述上清液5倍体积的-10℃的丙酮，过滤收集沉淀，将所述沉淀干燥后得到粉末；
(6)将所述粉末溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中，加入饱和硫酸铵至饱和度为0.25，离心去除沉淀，然后取上清液调节pH值至4.0，加饱和硫酸铵至饱和度为0.50，得到盐析物；
(7)将所述盐析物溶于pH8.0的10mmol/L Tris-Hcl缓冲液中，超滤得到超滤液；
(8)将所述超滤液用SephadexG-25脱盐后，干燥得到鹿胎盘活性蛋白。
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