[发明专利]一种虾肝肠胞虫可视化快速检测试剂盒在审
| 申请号： | 201811343889.8 | 申请日： | 2018-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN109337990A | 公开（公告）日： | 2019-02-15 |
| 发明（设计）人： | 薛淑霞;孙妍 | 申请（专利权）人： | 天津市水生动物疫病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 天津一同创新知识产权代理事务所(普通合伙) 12231 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300221 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速检测试剂盒 核酸提取 仪器设备 可视化 操作流程 待测样品 发明试剂 钙黄绿素 假阳性率 提取核酸 整个操作 大型的 检测管 灵敏度 试剂盒 检测 染料 磁珠 高端 开盖 | ||
1.一种虾肝肠胞虫可视化快速检测试剂盒，其特征是包括：
试剂A：组织裂解液Ⅰ；
试剂B：组织裂解液Ⅱ；
试剂C：异丙醇；
试剂D：体积百分比浓度为65％-80％的乙醇水溶液；
试剂E：灭菌双蒸水；
试剂F：90-110mg核酸提取磁珠重悬在1ml的双蒸水中；
试剂G：虾肝肠胞虫阳性质粒；
装有试剂H的检测管：在检测管中按比例装有10×Buffer 2.5μl，10mM的脱氧核糖核苷酸2.5μl，100mM的MgSO4 2μl，5M的甜菜碱1μl；
100μM的引物EHP-FIP 0.4μl，所述引物EHP-FIP的核苷酸序列用SEQ ID NO.1所示；
100μM的引物EHP-BIP 0.4μl，所述引物EHP-BIP的核苷酸序列用SEQ ID NO.2所示；
100μM的引物EHP-LF 0.2μl，所述引物EHP-LF的核苷酸序列用SEQ ID NO.3所示；
100μM的引物EHP-LB 0.2μl，所述引物EHP-LB的核苷酸序列用SEQ ID NO.4所示；
100μM的引物EHP-F3 0.05μl，所述引物EHP-F3的核苷酸序列用SEQ ID NO.5所示；
100μM的引物EHP-B3 0.05μl，所述引物EHP-B3的核苷酸序列用SEQ ID NO.6所示；
8U/μl的Bst DNA聚合酶1μl，钙黄绿素染料灭菌双蒸水11.7μl混合的试剂H；
研磨棒，一次性吸管，牙签，1.5ml样品管和磁力架。
2.根据权利要求1所述的一种虾肝肠胞虫可视快速检测试剂盒，其特征是所述虾肝肠胞虫阳性质粒是用下述方法制成：将人工合成的用SEQ ID NO.7所示的核苷酸序列连接到pMD-18T载体上并转化到TOP10细胞中，测序鉴定阳性克隆子，把测序正确的阳性克隆子在LB培养基中培养，用质粒提取试剂盒提取质粒即为虾肝肠胞虫阳性质粒。
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