[发明专利]一种碱性尿酸氧化酶及其在检测试剂盒和降低食品中尿酸的应用

说明书

一种碱性尿酸氧化酶及其在检测试剂盒和降低食品中尿酸的应用。其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。由酵母菌尿酸氧化酶重组为一种高活性碱性尿酸氧化酶，能够降解、测定和检测碱性环境下的样品，比已有报道的酶类具有更宽的碱性测定范围和更高的催化效率，有利于提高生产效率、降低成本，更利于工业应用。本发明利用碱性尿酸氧化酶通过比色法检测尿酸的含量的试剂盒，此试剂盒特异性强、灵敏度高、方法简便。利用碱性尿酸氧化酶研制低嘌呤食品，在低嘌呤食品中有较高应用价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域以及食品领域，具体是一种碱性尿酸氧化酶及其在检测试剂盒和降低食品中尿酸的应用。

背景技术

尿酸氧化酶，Urate oxidase，简称UOX；EC.1.7.3.3，是生物体内嘌呤代谢途径中的一种酶,将尿酸、水以及氧气催化分解为尿囊素和过氧化氢。UOX具有重要的商业应用价值，UOX专一性强、催化效率高，被用于血清尿酸的临床检测，基于固定化尿酸氧化酶的尿酸传感器检测，痛风患者的降尿酸治疗，脑梗的溶栓治疗等(开雷,岳珂,马晓航.尿酸氧化酶的研究及其应用.科技通报,2008(02):183-187)。

因为人类在进化过程中表达尿酸氧化酶的基因发生突变，无法合成尿酸氧化酶，所以尿酸是人体内嘌呤代谢的最终产物。当血浆内尿酸的含量超过6.8mg/dL时，被称为高尿酸血症，大约5％-12％的高尿酸血症最终发展为痛风。痛风是一种单钠尿酸盐沉积所致的晶体相关性关节病，与嘌呤代谢紊乱及尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关，属于代谢性风湿病。痛风是急性特征性关节炎和慢性痛风石疾病，可并发肾脏病变，重者可出现关节破坏、肾功能受损等(中华医学会风湿病学分会.原发性痛风诊断和治疗指南.中华风湿病学杂志，2011，15(6)：410-413)。

正常人体内尿酸含量约1000mg-1200mg，每天经由细胞新陈代谢产生尿酸约500mg，由饮食产生约100mg，而经由肾脏和汗液排泄尿酸约600mg，如果每天尿酸的生成和排泄量相当，体内尿酸代谢处于平衡状态。人体内的尿酸来源于嘌呤代谢，当体内嘌呤增多，就会产生较多的尿酸，当肾脏不能及时将尿酸排出体外时，就可引起高尿酸血症或痛风(毛玉涛，王明力，张洪.低嘌呤食品的认识与发展.食品研究与开发，2012，12(33)：228-231)。

UOX广泛存在于多种动物、豆科植物及微生物中。微生物来源的UOX具有来源广、酶活稳定、容易扩大生产等优点，因此，通过高密度发酵微生物成为早期工业化生产获得UOX的重要途径。目前商品化UOX主要是提取法生产，例如合肥博美公司从产朊假丝酵母中提取UOX，南京都莱公司从曲霉的发酵液中提取UOX，日本TOYOBO公司从芽孢杆菌中提取重组UOX。(S.Asano,K.Yamamoto,S.Teshima,T.Kikuchi and Y.Kawamura；Rinsho Kagaku,Study of a Liquid Type Reagent for Determination of Uric Acid by UsingThermostable Recombinant Uricase.Ikagaku Shinpojumu，1994,23(3):214-220)

然而，大多数尿酸氧化酶只能在弱碱环境中维持较高活力，存在pH适用范围较窄、温度适用范围较窄、碱性环境下储存稳定性差、酶活损失较快等问题。因此，有必要开发新型碱性高活性微生物UOX，将其应用于临床检测领域并进一步扩展其应用领域。

发明内容

本发明的目的是提供一种碱性尿酸氧化酶及其在检测试剂盒和降低食品中尿酸的应用，碱性尿酸氧化酶在降解尿酸以及在检测尿酸含量中的应用和在降低食品中尿酸含量的应用。

本发明的技术方案是：提供一种编码Arxula adeninivorans碱性尿酸氧化酶蛋白的基因，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示。

所述基因所编码的蛋白质，其氨基酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。