[发明专利]1α,25-二羟基维生素D高效液相色谱质谱联用法检测试剂盒

权利要求书

1.一种高效液相色谱质谱联用法检测试剂盒，其特征在于，包括：

(1)质控品，所述质控品含1α,25-二羟基维生素D2和1α,25-二羟基维生素D3；

(2)同位素内标提取液，所述同位素内标提取液含有1α,25-二羟基维生素D2-d6和1α,25-二羟基维生素D3-d6；

(3)稀释液，所述稀释液为饱和一元醇；

(4)转化液，所述转化液含有4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(PTAD)；

(5)复溶液，所述复溶液为水；

(6)流动相添加剂A，所述流动相添加剂A为饱和一元羧酸；以及

(7)流动相添加剂B，所述流动相添加剂B为C1-C3胺化合物。

2.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括(8)对照品，所述对照品含1α,25-二羟基维生素D2和1α,25-二羟基维生素D3。

3.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述流动相添加剂B为甲胺。

4.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元羧酸选自下组：甲酸、乙酸、丙酸、丁酸或其组合。

5.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元羧酸为甲酸。

6.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元醇选自下组：甲醇、乙醇或其组合。

7.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述饱和一元醇为甲醇。

8.一种通过高效液相色谱质谱联用法测定所取的生物样品中一种或多种二羟基维生素D代谢物的量的方法，包括：

(i)通过电喷雾离子源(ESI)对所述一种或多种二羟基维生素D代谢物和内标进行电离，分别产生所述一种或多种二羟基维生素D代谢物和所述内标的至少一种前体离子；

(ii)分别产生所述一种或多种二羟基维生素D代谢物和所述内标的所述前体离子的一种或多种碎片离子；和

(iii)比较步骤(i)或(ii)或两者中产生的所述一种或多种二羟基维生素D代谢物和所述内标的一种或多种所述离子的量以确定所述生物样品中的所述一种或多种二羟基维生素D代谢物的量；

其中，色谱检测过程中的流动相中加入C1-C3胺化合物。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述一种或多种二羟基维生素D代谢物包括1α,25-二羟基维生素D2，且其中所述1α,25-二羟基维生素D2的所述母离子的质/荷比为635.4±0.5；和/或

所述一种或多种二羟基维生素D代谢物包括1α,25-二羟基维生素D3，且其中所述1α,25-二羟基维生素D3的所述母离子的质/荷比为623.4±0.5。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，其中所述一种或多种碎片离子包括选自质/荷比为314.4±0.5的离子的一种或多种离子。