[发明专利]一种PLG和CRD功能片段重组融合蛋白及其制备方法和抗癌药物有效
申请号: | 201811358119.0 | 申请日: | 2018-11-15 |
公开(公告)号: | CN109503719B | 公开(公告)日: | 2022-03-08 |
发明(设计)人: | 高晓鸽;郑骏年;姚宏;刘相叶;蒋品 | 申请(专利权)人: | 徐州医科大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/70;A61K38/48;A61K47/42;A61P35/00;A61P35/02 |
代理公司: | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 11108 | 代理人: | 王宇 |
地址: | 221004 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 plg crd 功能 片段 重组 融合 蛋白 及其 制备 方法 抗癌 药物 | ||
1.一种PLG和CRD功能片段重组融合蛋白,其特征在于,人血纤维蛋白溶酶原第五个kringle结构域(PLG)功能片段通过连接肽与半乳糖凝集素-3的糖基结合结构域(CRD)功能片段结合;
所述人血纤维蛋白溶酶原第五个kringle结构域功能片段起始于人血纤维蛋白溶酶原第481位氨基酸,含端点,终于人血纤维蛋白溶酶原第560位氨基酸,具体氨基酸序列为:SEQ. NO.1;
所述半乳糖凝集素-3的糖基结合结构域功能片段起始于半乳糖凝集素-3第107位氨基酸,含端点,终于半乳糖凝集素-3第250位氨基酸,具体氨基酸序列为: SEQ. NO.2。
2.根据权利要求1所述的PLG和CRD功能片段重组融合蛋白,其特征在于,所述人血纤维蛋白溶酶原第五个kringle结构域功能片段的羧基端与连接肽的氨基端相连,半乳糖凝集素-3的糖基结合结构域功能片段的氨基端与连接肽的羧基端相连。
3.根据权利要求1所述的PLG和CRD功能片段重组融合蛋白,其特征在于,所述人血纤维蛋白溶酶原第五个kringle结构域功能片段的氨基端与连接肽的羧基端相连,半乳糖凝集素-3的糖基结合结构域功能片段的羧基端与连接肽的氨基端相连。
4.根据权利要求1至3中任意一条所述的PLG和CRD功能片段重组融合蛋白,其特征在于,所述连接肽是柔性连接肽或刚性连接肽。
5.根据权利要求4所述的PLG和CRD功能片段重组融合蛋白,其特征在于,所述连接肽的氨基酸序列为:SEQ. NO. 3或SEQ. NO.4。
6.根据权利要求1所述的PLG和CRD功能片段重组融合蛋白的制备方法,其特征在于,首先,将融合蛋白的表达基因克隆于pET-22b(+)表达载体,得到重组的表达质粒,然后,将表达质粒转化到原核细胞中诱导表达,并对诱导剂浓度、诱导温度、诱导时间进行优化;最后,收集细菌,超声破碎裂解得到包含融合蛋白的上清,利用乳糖层析柱进行纯化后,得到不含标签、纯度大于95%的权利要求1所述的可溶性PLG和CRD功能片段重组融合蛋白。
7.一种抗癌药物,其特征在于,包括权利要求1所述的PLG和CRD功能片段重组融合蛋白。
8.根据权利要求7所述的抗癌药物,其特征在于,所述抗癌药物为静脉注射、皮下注射、肌肉注射、口服、舌下给药或喷雾药物中的任意一种。
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