[发明专利]抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型在审

专利信息
申请号: 201811358501.1 申请日: 2018-11-14
公开(公告)号: CN109394784A 公开(公告)日: 2019-03-01
发明(设计)人: 赖俊凯;陈仲奇;陈献堂;赵美玲 申请(专利权)人: 苏州致诺优生物医学有限公司
主分类号: A61K35/13 分类号: A61K35/13;A61K49/00;C12N5/09;A01K67/027
代理公司: 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 代理人: 黄冠华
地址: 215010 江苏省苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 头颈部癌 肿瘤药物 中空纤维反应器 筛选模型 小鼠 目标药物 肿瘤病理 给药 构建 植入 肿瘤 异种移植模型 醋酸 健康小鼠 灭菌处理 实验成本 细胞贴附 小鼠背部 药效评价 药效实验 电浆 改制
【权利要求书】:

1.一种抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,其构建的具体步骤包括:

1)采用醋酸电浆将中空纤维反应器表面改制5~15min,灭菌处理10~30min;

2)将头颈部癌细胞株或头颈部癌病患肿瘤组织进行消化处理,获得头颈部癌肿瘤单细胞;

3)将头颈部癌肿瘤单细胞植入中空纤维反应器内,封口,并将中空纤维反应器放入培养皿中,加入RPMI-1640培养基,进行细胞贴附培养,1~3天后将中空纤维反应器取出,待用;

4)确定目标药物,以健康小鼠为给药对象,取步骤3)获得的中空纤维反应器植入健康小鼠背部,24h后建立小鼠头颈部癌肿瘤病理模型;

5)将目标药物施用于小鼠头颈部癌肿瘤病理模型,每隔1~2天给药一次,于给药2天、4天、8天、10天取出中空纤维反应器,检测头颈部癌肿瘤单细胞活性,并以头颈部癌肿瘤单细胞活性作为评价抗头颈部癌肿瘤药物的指标,由此完成对所述抗头颈部癌肿瘤药物筛选模型的构建过程。

2.根据权利要求1所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,所述中空纤维反应器包括多根平行排列的中空纤维管;每个所述中空纤维管表面均分布有多个孔洞。

3.根据权利要求2所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,所述中空纤维管的直径为70~100μm,壁厚为2~4μm,长度为3~5cm。

4.根据权利要求2所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,所述中空纤维反应器的尺寸为3cm×0.5cm~5cm×0.5cm;所述孔洞的直径为100~300nm。

5.根据权利要求1所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,将中空纤维反应器植入健康小鼠背部前,还进行预处理的步骤;所述预处理步骤具体为:用胰岛素针抽取麻醉剂注入小鼠腹腔,并在背部剪出0.5cm宽的切口。

6.根据权利要求1所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,所述头颈部癌肿瘤单细胞的植入密度为2×105细胞/5μl。

7.根据权利要求1所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,所述给药途径为腹腔注射。

8.根据权利要求1所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,所述头颈部癌肿瘤单细胞活性检测具体为:

1)将中空纤维反应器浸泡于2ml的第一移液器中,第一移液器中含有200μl 0.5%噻唑蓝溶液和1000μl磷酸盐缓冲溶液,中空纤维反应器避光保存30min,离心分离出头颈部癌肿瘤单细胞;

2)将中空纤维反应器置于含有500μl二甲基亚砜的2ml第二移液器,避光保存24h;

3)取经步骤2)处理的细胞溶液100μl至于96孔盘,测定570nm吸光度值,以判断头颈部癌肿瘤单细胞的存活率。

9.根据权利要求1所述的抗头颈部癌肿瘤药物的筛选模型,其特征在于,所述目标药物为抗头颈部癌肿瘤药物。

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