[发明专利]一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和检测试剂盒有效
| 申请号： | 201811369192.8 | 申请日： | 2018-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN109486970B | 公开（公告）日： | 2021-12-07 |
| 发明（设计）人： | 陶均;陈银华;何朝族;郑琳琳;李春霞;牛晓磊;冯世鹏 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 胡素丽;刘明星 |
| 地址： | 570228 海南省海口市*** | 国省代码： | 海南;46 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 水稻 黄单胞菌 环介导 等温 扩增 检测 引物 方法 试剂盒 | ||
1.一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测引物组，其特征在于，所述的检测引物组如下所示：
FIP：5’-GGTGGACACCGAGGTGATCATCCGAGCAGTCGGACTACGT-3’；
BIP：5’-GCGAGGACCGTCTGACCGAACGGCTGGAACGAATACTTGA-3’；
Floop：5’-CACGCCTTCGCTGAGTTCGA-3’；
Bloop：5’-ACCCTGCATTTCGGCAAGTT-3’；
F3：5’-GATTCGGCCACGCTGTAC-3’；
B3：5’-TGCTTCTTGCCCTTGTCG-3’。
2.一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测试剂盒，包括环介导等温扩增反应液、BstDNA聚合酶、钙黄绿素显色液和检测引物组，其特征在于，所述的检测引物组如下所示：
FIP：5’-GGTGGACACCGAGGTGATCATCCGAGCAGTCGGACTACGT-3’；
BIP：5’-GCGAGGACCGTCTGACCGAACGGCTGGAACGAATACTTGA-3’；
Floop：5’-CACGCCTTCGCTGAGTTCGA-3’；
Bloop：5’-ACCCTGCATTTCGGCAAGTT-3’；
F3：5’-GATTCGGCCACGCTGTAC-3’；
B3：5’-TGCTTCTTGCCCTTGTCG-3’。
3.一种水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测方法，其特征在于，包括以下步骤：提取水稻样品的基因组DNA作为模板，使用权利要求1所述的水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测引物组，与环介导等温扩增反应液、Bst DNA聚合酶、钙黄绿素显色液及水稻样品基因组DNA混合形成环介导等温扩增反应体系，进行环介导等温扩增反应，确认水稻样品中是否含有水稻白叶枯病菌或细菌性条斑病菌。
4.根据权利要求3所述的水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测方法，其特征在于，所述的确认水稻样品中是否含有水稻白叶枯病菌或细菌性条斑病菌具体为：若扩增产物有绿色荧光，则水稻样品中含有水稻白叶枯病菌或细菌性条斑病菌；若扩增产物没有绿色荧光，则水稻样品中不含有水稻白叶枯病菌或细菌性条斑病菌。
5.根据权利要求3所述的水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测方法，其特征在于，所述的环介导等温扩增反应体系总体积20μL，包括20mM Tris-Cl、10mM KCl、8mM MgSO4、10mM(NH4)2SO4、0.1％Tween 20、0.8M甜菜碱、1.4mM dNTPs、0.5mM MnCl2、25μM钙黄绿素、2pmol/μL Floop、2pmol/μL Bloop、8pmol/μL FIP、8pmol/μL BIP、1pmol/μL F3、1pmol/μL B3、BstDNA聚合酶10U和基因组DNA 8μL，余量为ddH2O。
6.根据权利要求3所述的水稻黄单胞菌的环介导等温扩增检测方法，其特征在于，所述的环介导等温扩增反应的反应条件为：65℃水浴45分钟。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于海南大学，未经海南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811369192.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种定向筛选产生正丙醇菌株的方法
- 下一篇：一种近岸海水中沙门氏菌的检测方法
