[发明专利]一种马铃薯多酚氧化酶的提取方法

说明书

本发明公开了一种马铃薯多酚氧化酶的提取方法，该方法包括以下工艺步骤：称取100‑150g成熟马铃薯果实,切成细块状,按2：1(g：mL)的比例加入50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液,一起匀浆2min,而后放入4℃冰箱中浸提3h,取出用纱布过滤,再在2℃条件下离心15‑20min,收集上清液作为马铃薯多酚氧化酶液。本发明实现后与现有技术相比具有成本低，杂质含量少，生产过程对环境无污染等优点。

技术领域：

本发明涉及一种马铃薯多酚氧化酶的提取方法，属于中药有效成分提取领域。

背景技术：

马铃薯（学名：Solanum tuberosum，英文：potato），茄科茄属，一年生草本植物，别称土豆、地蛋、洋芋等。马铃薯是中国五大主食之一，其营养价值高、适应力强、产量大，是全球第三大重要的粮食作物，仅次于小麦和玉米。马铃薯是块茎繁殖，可入药，性平味甘，可以治胃痛、痄肋、痈肿等疾病。

多酚氧化酶 ( Polyphenol Oxidase, 简称 PPO)是果蔬体内普遍存在的一类含铜的氧化还原酶。果蔬组织中发生的褐变现象主要是由于 PPO催化富含在果蔬中的酚类物质的氧化反应所引起的。因此, 开展果蔬 PPO的提取、纯化及其特性研究, 受到了国内外学者的广泛关注。可是迄今为止, 关于马铃薯 PPO 的提纯与特性研究尚未见报道。为此,开展了马铃薯 PPO 的提取研究,旨为今后进一步开展马铃薯果实 PPO 的特性及其酶促褐变抑制等研究奠定基础。

发明内容：

本发明是针对现有技术的不足，旨在提供一种高效性和选择性、操作简便、产率高、副产物少、可工业化实现的制备马铃薯多酚氧化酶的方法。

本发明的技术方案按照下列步骤进行：

a.称取 100-150 g成熟马铃薯果实, 切成细块状, 按 2：1 ( g：mL) 的比例加入50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液, 一起匀浆 2min。

b.而后放入 4℃冰箱中浸提 3 h, 取出用纱布过滤。

c.再在2℃条件下离心15-20min, 收集上清液作为马铃薯多酚氧化酶液。

步骤a中所述加入的磷酸盐缓冲溶液浓度为0.1mol/L, pH值7.0。

步骤c中所述离心机转速为10000 r/min。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

称取 100g成熟马铃薯果实, 切成细块状, 按 2：1 ( g：mL) 的比例加入 50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液, 一起匀浆 2min。而后放入 4℃冰箱中浸提 3 h, 取出用纱布过滤。再在2℃条件下离心15min, 收集上清液作为马铃薯多酚氧化酶液，其得率为80.01%。

实施例2：

称取 100g成熟马铃薯果实, 切成细块状, 按 2：1 ( g：mL) 的比例加入 50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液, 一起匀浆 2min。而后放入 4℃冰箱中浸提 3 h, 取出用纱布过滤。再在2℃条件下离心20min, 收集上清液作为马铃薯多酚氧化酶液，其得率为79.6%。

实施例3：

称取150 g成熟马铃薯果实, 切成细块状, 按 2：1 ( g：mL) 的比例加入 50mL预冷的磷酸盐缓冲溶液, 一起匀浆 2min。而后放入 4℃冰箱中浸提 3 h, 取出用纱布过滤。再在2℃条件下离心20min, 收集上清液作为马铃薯多酚氧化酶液，其得率为82.3%。