[发明专利]郁金香基腐病菌LAMP可视化检测方法

权利要求书

1.一种检测郁金香基腐病菌的LAMP引物可视化检测方法，其特征在于，自行设计的郁金香基腐病菌的LAMP特异引物对，能够对郁金香基腐病菌进行分子生物学特异性检测，

引物序列如下：

Fot-F3: 5’- ACCTGATCCGAGGTCAACAT

Fot-B3: 5’- CAGTATTCTGGCGGGCATG

Fot-FIP:

5’- CACGTCGAGCTTCCATAGCGT-AGAAGTTGGGGTTTAACGGC

Fot-BIP:

5’- TGAGGAACGCGAATTAACGCGA-GTTCGAGCGTCATTTCAACC

引物用于植物及植物产品中郁金香基腐病菌基因组DNA的特异性检测。

2.一种检测郁金香基腐病菌的LAMP扩增体系：总反应体系为25 μL，包括10×ThermoPoL Buffer 2.5 μL、2.5 mmol/L dNTPs 2.5 μL、100 mmol/L MgSO₄ 1μL、10 mmol/LPH-FIP 1.6 μL、10 mmol/L PH-BIP 1.6 μL、10 mmol/L PH-F3 0.2 μL、10 mmol/L PH-B30.2 μL、8 U/μL Bst DNA Polymerase 1 μL、DNA模板1 μL，加dH₂O补足至25μL，混匀。

3.一种检测郁金香基腐病菌的LAMP引物对及其扩增方法，使用权利要求2所述的扩增体系，反应程序为：63℃在水浴锅中反应70min，之后在85℃下灭活5min，

扩增产物中加入1 μL SYBR Green I荧光染料进行染色反应。

4.权利要求1所述郁金香基腐病菌的LAMP特异性检测引物及权利要求2、3所述的扩增体系和扩增方法在在特异性检测郁金香基腐病菌方面的应用。