[发明专利]条纹斑竹鲨免疫球蛋白新抗原受体可变区库引物及应用有效
申请号: | 201811381143.6 | 申请日: | 2018-11-20 |
公开(公告)号: | CN111197074B | 公开(公告)日: | 2023-08-15 |
发明(设计)人: | 杨乃波;项海涛;刘楚新;王媚娘;危立坤;史家海 | 申请(专利权)人: | 深圳华大生命科学研究院;香港城市大学深圳研究院 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;白艳 |
地址: | 518083 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 条纹 斑竹 免疫球蛋白 抗原 受体 可变 引物 应用 | ||
1.一种扩增条纹斑竹鲨免疫球蛋白新抗原受体可变区的成套引物,其包括引物组甲和引物组乙;
所述引物组甲包括50条引物;
所述50条引物分别为序列13至序列62所示的单链DNA分子;
所述引物组乙包括42条引物;
所述42条引物分别为序列63至序列104所示的单链DNA分子。
2.根据权利要求1所述的成套引物,其特征在于:
所述引物组甲中的各条引物的配比均为等摩尔比;
和/或,所述引物组乙中的各条引物的配比均为等摩尔比;
和/或,所述引物组甲中一条引物与所述引物组乙中的一条引物的摩尔比为1:10-10:1。
3.根据权利要求1或2所述的成套引物,其特征在于:
所述引物组甲中一条引物与所述引物组乙中的一条引物的摩尔比具体为5:6。
4.含有权利要求1-3中任一所述的成套引物的PCR试剂或试剂盒。
5.根据权利要求4所述的PCR试剂或试剂盒,其特征在于:
所述引物组甲中每条引物在所述PCR试剂或试剂盒中的浓度为0.004μM~0.2μM;
和/或,所述引物组乙中每条引物在所述PCR试剂或试剂盒中的浓度为0.004μM~0.2μM。
6.根据权利要求5所述的PCR试剂或试剂盒,其特征在于:
所述引物组甲中每条引物在所述PCR试剂或试剂盒中的浓度为0.004μM;
所述引物组乙中每条引物在所述PCR试剂或试剂盒中的浓度为0.0048μM。
7.权利要求1-3中任一所述的成套引物或权利要求4所述PCR试剂或试剂盒在如下任意一种中的应用:
e1)扩增条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体的可变区;
e2)构建条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体的可变区文库;
e3)扩增条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体基因簇;
e4)制备扩增条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体的可变区的产品。
8.一种扩增条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体的可变区的方法,包括如下步骤:使用权利要求1-3中任一所述的成套引物对条纹斑竹鲨进行多重PCR扩增,实现扩增条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体的可变区。
9.一种构建条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体的可变区的核酸文库的方法,包括如下步骤:使用权利要求8所述方法进行扩增获得扩增产物,将所述扩增产物进行核酸文库构建,实现构建条纹斑竹鲨的免疫球蛋白新抗原受体的可变区的核酸文库。
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