[发明专利]一种使用HPLC测定中药一贯煎的指纹图谱方法

说明书

本发明公开了一种使用HPLC测定中药一贯煎的指纹图谱方法，包括以下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱，以乙腈、甲醇中的一种或两种的混合物为流动相A，以甲酸水溶液、乙酸水溶液、磷酸水溶液中的一种为流动相B，对一贯煎试样溶液进行梯度洗脱，然后采用DAD检测器进行检测。本发明提出的一种使用HPLC测定中药一贯煎的指纹图谱方法，具有快速、简便、全面、准确可靠的优点。

技术领域

本发明涉及中药检测技术领域，尤其涉及一种使用HPLC测定中药一贯煎的指纹图谱方法。

背景技术

“一贯煎”的处方来源于清代钱敏捷所著《医方絜度》，“一贯煎(柳洲)主肝血衰少，脘痛，胁疼”。

“一贯煎”处方组成：北沙参、麦冬、当归各一钱五分，枸杞、生地各三钱，川楝子二钱。

“一贯煎”功能主治：具有滋阴疏肝的功效；主治肝肾阴虚，肝气郁滞证，胸脘胁痛，吞酸吐苦，咽干口燥，舌红少津，脉细弱或虚弦，并治疝气瘕聚。现代临床应用主要用于胃溃疡、胃炎、慢性肝炎、肋间神经痛、高血压、神经官能症等的治疗。

中药指纹图谱借用DNA指纹图谱发展而来。最早发展起来的是中药化学成分色谱指纹图谱，特别是高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。HPLC具有高的分辨率，可将不同的化学成分进行分离而形成高低不同的色谱峰组成一张色谱图，这些色谱峰的高度和峰面积分别代表了各种不同化学成分及其含量。整个色谱图表征了该样品所含化学成分的多少和量的大小。

中药指纹图谱在现代及未来的中药质量控制中均占有很重要的地位，符合中医中药整体性和模糊性的特点，其可分析中药中有效成分和无效成分的种类和含量分布的信息，随着越来越多的技术不断被应用于中药指纹图谱的研究，中药指纹图谱必在中药质量控制、中药药效成分研究、中药作用机制研究等多方面发挥更加重要的作用。

中药指纹图谱比DNA指纹图谱更具优势，不但有特征的体现(各种化学成分的个数和相对位置——保留时间)可作定性鉴别使用，还体现了量的概念，峰的高度和峰面积表征了某个化学成分的含量，而各峰的峰高(或峰面积)的比值体现了各种化学成分间的相对含量。定性和定量的结合赋予中药指纹图谱更大的功效。中药指纹图谱不仅可以进行个体、某物种的“唯一性”的鉴定，还可以将其“量”的特征和其他体系挂钩，例如和药效研究结果挂钩。银杏提取物的指纹图谱体现了其所含33个银杏黄酮(化学成分)和各自含量。德国经30多年的化学成分和药效相关研究，发现约24％银杏黄酮和约6％银杏内酯组成的银杏提取物(有相应的指纹图谱控制其成分和相对含量)具有最好的疗效就是一个典型示例。因此，中药指纹图谱不仅是一种中药质量控制模式和技术，更可以发展成为一种采用各种指纹图谱来进行中药理论(复杂系统)和新药开发的研究体系和研究模式^[1]。(参考文献：[1])罗国安，王义明，曹进，多维多息特征谱及其应用[J].中成药，2000，22(6):395)

为了控制中药复方一贯煎的质量，如果用一两种当归、生地黄等的活性成分来说明中药一贯煎的内在质量，具有一定的片面性。要控制中药一贯煎的功效，只针对其一两个化学成分进行表征和控制是不够的，必须对它的物质群整体予以控制。在现有的技术中，没有适合快速、简便、精确的分析方法能用于中药一贯煎各种化学成分的个数、相对位置(保留时间)的特征鉴别和含量分布(峰的高度和峰面积表征了某个化学成分的含量，而各峰的峰高(或峰面积)的比值体现了各种化学成分间的相对含量)等相关信息检测。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种使用HPLC测定中药一贯煎的指纹图谱方法，具有快速、简便、全面、准确可靠的优点。

本发明提出的一种使用HPLC测定中药一贯煎的指纹图谱方法，包括以下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填充剂，以乙腈、甲醇中的一种或两种的混合物为流动相A，以甲酸水溶液、乙酸水溶液、磷酸水溶液中的一种为流动相B，对一贯煎试样溶液进行梯度洗脱，然后采用DAD检测器进行检测。