[发明专利]黄瓜雌性SNP分子标记及其应用有效
| 申请号： | 201811390571.5 | 申请日： | 2018-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN109234446B | 公开（公告）日： | 2021-08-31 |
| 发明（设计）人： | 李利斌;曹齐卫;杨宗辉;孟昭娟;王永强;杨桂兰 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人： | 韩百翠 |
| 地址： | 250100 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 黄瓜 雌性 snp 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种黄瓜雌性SNP分子标记，其特征在于，包含SNP1和SNP2，所述SNP分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
所述SNP1为SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列的第116位，其多态性为T/C；
所述SNP2为SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的第222位，其多态性为G/A；
SNP1均为T且SNP2均为G对应黄瓜雌性性状，SNP1均为C且SNP2均为A对应黄瓜非雌性性状。
2.权利要求1所述黄瓜雌性SNP分子标记在鉴定黄瓜雌性性状中的应用。
3.一种鉴定黄瓜雌性性状的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）提取待测黄瓜基因组的DNA；
2）以待测黄瓜的基因组DNA为模板，利用引物对SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2进行PCR扩增反应；
3）分析扩增产物的SNP位点，SNP1均为T且SNP2均为G对应黄瓜雌性性状，SNP1均为C且SNP2均为A对应黄瓜非雌性性状。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2）中的PCR扩增反应体系为：10ng/μlDNA模板1μl，10pmol/μl引物各1μl，10mmol/L dNTPmix 0.5μl， TaqDNA聚合酶1μl，10×PCR反应缓冲液2.5μl，余量为超纯水，补齐至25μl；
所述步骤2）中的PCR扩增反应的程序为：95℃变性30s， 56℃退火 45s，72℃延伸1min，20循环；最后72℃延伸10min。
5.权利要求1所述黄瓜雌性SNP分子标记在黄瓜雌性分子标记辅助育种中的应用。
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