[发明专利]一个烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8及其应用

权利要求书

1.烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8的编码基因NtSLAH8基因，其特征在于，该基因CDS序列包括579bp碱基，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其中第1位-388位核苷酸为特异性核酸片段。

2.一种PCR扩增获得权利要求1所述NtSLAH8基因的方法，其特征在于，具体步骤为：

（1）提取烟草样品的总RNA，并反转录为cDNA备用；

（2）设计扩增引物序列如下：

F：5’- CGCGAGCTCGGTACCATGGTTGCAAATCCAACT -3’，

R：5’- GCTCACCATGGATCCATTACGTTTAGTGAAGT -3’；

以步骤（1）中所制备cDNA为模板，利用上述引物进行PCR扩增。

3.权利要求1所述NtSLAH8基因所编码的烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8蛋白，其特征在于，该蛋白为一种离子通道蛋白，与氯离子转运相关，包括192个氨基酸，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.权利要求2所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8在烟草中的应用，其特征在于，用于转运氯离子。

5.权利要求1所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8的编码基因NtSLAH8基因在烟草中的应用，其特征在于，将该基因沉默后，植物体内氯离子含量明显下降。

6.利用权利要求1所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8的编码基因NtSLAH8基因所构建的用于沉默NtSLAH8基因的瞬时沉默VIGS载体，其特征在于，其构建方法为：利用病毒诱导的基因沉默技术，以所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8的编码基因NtSLAH8基因的特异性核苷酸片段作为引导序列，将该特异性核酸片段连接到瞬时表达载体TRV上，转化后，进一步经筛选、鉴定，构建获得瞬时沉默VIGS载体：TRV-NtSLAH8。

7.权利要求6所述用于沉默NtSLAH8基因的瞬时沉默VIGS载体在烟草中的应用，其特征在于，利用转基因技术，将该VIGS载体转化烟草植株后，用于沉默NtSLAH8基因，使得烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH8蛋白表达量明显降低甚至无法表达，最终降低植物体中氯离子含量。