[发明专利]一种胎盘组织保存液及其制备方法

说明书

本发明公布了一种胎盘组织保存液及其制备方法，所述胎盘组织保存液含有葡萄糖注射液，血清替代物，庆大霉素，两性霉素，海藻糖和肝素锂。所述胎盘组织保存液的制备方法为：向葡萄糖注射液内加入血清替代物、庆大霉素、两性霉素B、抗坏血酸磷酸酯镁盐水合物、海藻糖和肝素锂，使各成分的终浓度为0.5~2%，800 U/mL，15~30 ug/mL，0.25~0.5 mg/mL，0.6~3mg/mL，20~40U/mL。本发明的胎盘保存液成分明确，营养均衡，对细胞无明显毒副作用，能够很好的维持离体胎盘的细胞活力，而且能够有效防止采集运输环节导入的外源微生物污染。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种胎盘组织保存液及其制备方法。

背景技术

间充质干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞，又称多潜能基质细胞，简称MSCs，是属于中胚层的一类多能干细胞，主要存在于结缔组织和器官间质中，包括：骨髓、脐带、脂肪、粘膜、骨骼、肌肉、胎盘等。在适宜条件下可分化为脂肪、骨、软骨等多种组织细胞。与其他来源的MSC相比，胎盘来源的间充质干细胞因其取材方便，无道德伦理争议，可获取的细胞数量多、增殖能力强、免疫调节作用大，分泌细胞生长因子的总量也非常高，便于扩增和传代，同时又没有配型、排异等问题，极其适合用于临床研究和应用，是间充质干细胞的理想来源。

目前，市场上储存干细胞的公司很少在医院产房旁设立制备中心。因此胎盘采集好后，不可能立即就进入实验室制备，中间需要运输到GMP车间，要隔一段时间，少则2h，多则48~96 h，运输过程如何才能保证离体的胎盘细胞活性和干性，防止血液凝结，同时避免外界微生物的污染，成为亟需解决的问题。之前有专利通过向PBS或DMEM/F12中加入青霉素，链霉素，脐血浆，AIM-V无血清培养基，葡萄糖，右旋糖酐，氨基酸等物质保存离体胎盘，PBS市售价格昂贵，自己配制成分和步骤繁琐，青链霉素配成溶液后，有效期短，且青霉素的β内酰胺环在溶液条件下会被水解，形成的开环化合物具有很高的致敏性，增加了使用的风险。脐血浆成分复杂，且存在个体化差异，不能批量化生产，AIM~V无血清培养基价格比较贵，成分复杂，长时间常温保存易变性、营养流失。

发明内容

基于上述问题，本发明提供了一种胎盘组织保存液及其制备方法，具体内容如下：

本发明提供了一种胎盘组织保存液，其创新点在于：所述胚胎保存液包括以下组分：血清替代物、庆大霉素、两性霉素B、抗坏血酸磷酸酯镁盐水合物、海藻糖、肝素锂和葡萄糖注射液。

进一步的，每100mL所述胎盘组织保存液包括：

血清替代物 500~2000mg

庆大霉素 80000U

两性霉素B 1.5~3mg

抗坏血酸磷酸酯镁盐水合物 25~50mg

海藻糖 60~300mg

肝素锂 2000~4000U

葡萄糖 4.5~4.8g。

进一步的，所述葡萄糖注射液的质量分数为5%。