[发明专利]人工合成的polyA、哺乳动物细胞重组表达载体、哺乳动物宿主细胞、表达方法及应用在审
| 申请号： | 201811394238.1 | 申请日： | 2018-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN109486859A | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 王天云;王小引;徐丹华;赵春澎;姚朝阳;牛敬媛;宋超;李琴;杨献军 | 申请（专利权）人： | 新乡医学院;河南普诺易生物制品研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/67;C12N5/10 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 453003*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 哺乳动物细胞 重组表达载体 哺乳动物宿主细胞 生物技术领域 来源蛋白质 分泌表达 哺乳动物 可用 蛋白质 应用 翻译 | ||
1.一种人工合成的polyA，其特征在于：所述人工合成的polyA的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一种哺乳动物细胞重组表达载体，包含哺乳动物来源的蛋白质序列，其特征在于：所述哺乳动物细胞重组表达载体还含有如SEQ ID NO.1所示的人工合成的polyA的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的哺乳动物细胞重组表达载体，其特征在于：所述哺乳动物细胞重组表达载体中的启动子为SV40、CMV、EF-1α、CAG中的任意一种。
4.根据权利要求3所述的哺乳动物细胞重组表达载体，其特征在于：所述启动子为CMV启动子。
5.一种哺乳动物宿主细胞，其特征在于：所述哺乳动物宿主细胞由权利要求2～4中任一项所述的哺乳动物细胞重组表达载体转染得到。
6.根据权利要求5所述的哺乳动物宿主细胞，其特征在于：所述哺乳动物宿主细胞为CHO、HEK293、BHK或SP2/O。
7.一种哺乳动物细胞表达外源蛋白质的表达方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)构建包含哺乳动物细胞外源蛋白质序列以及如SEQ ID NO.1所示的人工合成的polyA的核苷酸序列的重组表达载体；
(2)将重组表达载体转入哺乳动物宿主细胞中；
(3)培养步骤(2)中的哺乳动物宿主细胞，表达目的蛋白。
8.如权利要求1所述的人工合成的polyA、如权利要求2所述的哺乳动物细胞重组表达载体、或者如权利要求5所述的哺乳动物宿主细胞在提高哺乳动物细胞重组蛋白表达水平中的应用。
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