[发明专利]一种罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基及发酵方法、应用

说明书

本发明涉及微生物发酵技术领域，为解决传统罗伊氏乳杆菌培养基发酵后有典型的不良风味的问题，提供了一种罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基及发酵方法、应用，每升罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基中包括：麦芽糖10～50g，大豆胨20～80g和麦芽浸粉30～100g。本发明发酵后风味中的酮类，脂类等芳香物质含量明显提高，活菌数提高43倍，发酵过程中无需调节pH，有利于大规模工业化生产；所得的活菌发酵液无需高能耗的冷冻干燥工艺，可直接添加到发酵酸奶中，没有引起产品的不良风味。

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，尤其涉及一种罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基及发酵方法。

背景技术

罗伊氏乳杆菌是一类普遍定植于人和动物肠道的益生菌，具有提高免疫力，调节肠道菌群，改善婴儿肠绞痛等的益生作用。罗伊氏乳杆菌WHH1689，具有添加到乳制品中室温下长保质期的特征，同时对肠应激综合征有明显的改善效果。

目前，国内外培养罗伊氏乳杆菌的培养基基本采用传统的MRS培养基，活菌数一般在1～5×10⁹cfu/ml，且发酵后有典型的不良风味。现有的乳酸菌生物制品都最终以冻干菌粉的形式呈现，以降低发酵液不良风味在菌粉中的影响。然而，对乳酸菌生物制品依赖冻干工艺存在着产品外观要求苛刻，工艺中易出现喷瓶、掉底、产品干燥不彻底、含水量过高等问题，需要使用冻干保护剂或工艺条件的严格控制来提高合格率，无形中增加了乳酸菌生物制品的生产成本，加大了工艺的复杂程度，且具有高能耗的缺点。

中国专利文献上公开了“促进罗伊氏乳杆菌生长天然添加剂的制备方法”，其公告号为CN101709287A，该发明利用中药提取物蒺藜，槐花，牛蒡的提取液作为天然添加剂，提高罗伊氏乳杆菌发酵活菌数最高至5.67×10⁹cfu/ml；中国专利文献上公开了“一种利用罗伊氏乳杆菌与醋杆菌共发酵高密度生产罗伊特林素的方法”，其公告号为CN107739747A，该发明通过罗伊氏乳杆菌培养代谢产生罗伊特林素；中国专利文献上公开了“一种罗伊氏乳杆菌专用发酵床”，其公告号为CN205710701U；中国专利文献上公开了“一种富硒罗伊氏乳杆菌高密度发酵方法”，其公告号为CN108048363A，该发明通过罗伊氏乳杆菌发酵得到兼具完全有机硒和高活菌数的发酵液。但是上述专利文献并没有从根本上有效解决传统罗伊氏乳杆菌培养基发酵后有典型的不良风味的问题。

发明内容

本发明为了克服传统罗伊氏乳杆菌培养基发酵后有典型的不良风味的问题，提供了一种能够同时改善发酵风味、提高发酵的活菌数的罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基。

本发明还提供了一种罗伊氏乳杆菌高密度发酵方法，发酵过程中无需调节pH，条件易于控制，所得发酵液无需高能耗的冻干工艺即可直接添加入生物制品中，生产成本低，有利于大规模工业化生产。

本发明还提供了一种利用罗伊氏乳杆菌高密度发酵方法制得的活菌发酵液在罗伊氏乳杆菌发酵生物制品中的应用。为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基，其特征在于，每升罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基中包括：麦芽糖10～50g，大豆胨20～80g和麦芽浸粉30～100g。

本发明通过测定罗伊氏乳杆菌的基因组序列，分析罗伊乳杆菌的糖代谢路径，发现麦芽糖的利用明显优于葡萄糖和蔗糖。此外，动物蛋白胨及微生物蛋白胨都具有各自典型的特殊不良风味，通过优选的具有大豆清香味的大豆胨替代动物蛋白胨，包括胰蛋白胨，牛肉膏，及部分酵母粉，培养基风味得到明显改善，从而达到改善发酵液风味的效果。麦芽浸粉具有生物活性的生长因子，可以显著地增殖微生物的生长和强化代谢物的分泌，通过添加麦芽浸粉，从而达到提高罗伊氏乳杆菌发酵后活菌数的效果。

作为优选，每升罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基中还包括：酵母粉5～15g，硫酸锰0.58g，硫酸镁0.28g，半胱氨酸盐酸盐0.5g，磷酸氢二钾2g，柠檬酸氢二胺2g，乙酸钠10g和吐温1g。