[发明专利]一种高纯度替考拉宁的生产工艺有效

专利信息
申请号: 201811403214.8 申请日: 2018-11-23
公开(公告)号: CN109608523B 公开(公告)日: 2023-01-10
发明(设计)人: 李军;黄晔;明国军;郭绍定;唐静;陈军 申请(专利权)人: 江苏九阳生物制药有限公司
主分类号: C07K9/00 分类号: C07K9/00;C12P21/02;C12R1/045
代理公司: 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 代理人: 陈娟
地址: 224300 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 纯度 替考 生产工艺
【权利要求书】:

1.一种高纯度替考拉宁的生产工艺,其特征在于,包括如下步骤:

1)配制斜面培养基、种子培养基和发酵培养基;

其中,斜面培养基的配制方法为:按照重量份数称取可溶性淀粉5- 8份、酵母膏0.5-1.5份、葡萄糖1-3份、琼脂粉2-4份、碳酸钙0.1-0.5份、乙酸0.2-1份、[Mg2-2xFe2x(OH)4][SO4]x·mH2O 2-4份配制斜面培养基,调节pH为6.8-7.0;

其中,种子培养基的配制方法为:按照重量份数称取可溶性淀粉7-10份、甘露醇3-5份、酵母粉3-6份、蛋白胨2-5份配制种子培养基,调节pH为7.2-7.4;

其中,发酵培养基的配制方法为:按照重量份数称取糊精1-3份、可溶性淀粉10-15份、黄豆粉2-5份、玉米浆6-10份、碳酸钙0.1-0.5份配制发酵培养基,调节pH为6.8-7.0;

2)刮取新鲜斜面接种到装有一定量种子培养基的250ml摇瓶中,在30℃条件下以200-210r/min的转速振荡培养4-5天,以8-10%接种量将游动放线菌接种到装有30-40ml发酵培养基的250ml三角瓶中,加入适量Diaion HP-20离子交换树脂,Diaion HP-20离子交换树脂与游动放线菌的加入体积比为1∶10,在30℃条件下以200-210r/min的转速振荡培养7-9天,得发酵液;

3)调节发酵液pH为10-11,在3500-3600r/min的条件下进行8-10min离心,取上清液,将上清液进行过滤,滤液经过吸附树脂层析柱,采用纯水进行一次洗脱,随后采用氨水进行二次洗脱,得洗脱液;

4)将洗脱液pH调节为6-7,通过节流分子量为6000-7000Da的超滤膜进行超滤,将超滤液进行浓缩、喷雾干燥,即得。

2.根据权利要求1所述的高纯度替考拉宁的生产工艺,其特征在于,所述x的取值为0或0.5或1。

3.根据权利要求1所述的高纯度替考拉宁的生产工艺,其特征在于,所述新鲜斜面规格为1cm×1cm。

4.根据权利要求1所述的高纯度替考拉宁的生产工艺,其特征在于,所述摇瓶中种子培养基的含量为30-40ml。

5.根据权利要求1所述的高纯度替考拉宁的生产工艺,其特征在于,所述吸附树脂层析柱的树脂颗粒大小为30-50目。

6.根据权利要求1所述的高纯度替考拉宁的生产工艺,其特征在于,浓缩液中水分含量为超滤液中水分含量的15-20%。

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